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我国外来入侵生物福寿螺种类的多重PCR鉴别方法
引用本文:贺超,杨倩倩,刘苏汶,刘光富,俞晓平. 我国外来入侵生物福寿螺种类的多重PCR鉴别方法[J]. 植物保护学报, 2019, 46(1): 97-105
作者姓名:贺超  杨倩倩  刘苏汶  刘光富  俞晓平
作者单位:中国计量大学生命科学学院, 浙江省生物计量及检验检疫重点实验室, 杭州 310018,中国计量大学生命科学学院, 浙江省生物计量及检验检疫重点实验室, 杭州 310018,中国计量大学生命科学学院, 浙江省生物计量及检验检疫重点实验室, 杭州 310018,中国计量大学生命科学学院, 浙江省生物计量及检验检疫重点实验室, 杭州 310018,中国计量大学生命科学学院, 浙江省生物计量及检验检疫重点实验室, 杭州 310018
基金项目:国家重点研发计划(2017YFF0210200),国家自然科学基金(31800462)
摘    要:为研发能快速、准确地鉴别在我国为害严重的3种福寿螺——小管福寿螺Pomacea canaliculata、斑点福寿螺P. maculata和新发现入侵种Pomacea sp.的PCR技术,基于其线粒体全基因组序列,通过比对分析找到种间差异区段,分别设计并筛选了上述3种福寿螺的特异性引物对,建立了多重PCR检测方法,对其特异性和灵敏度进行评价。结果表明,所设计的引物特异性强,能从不同地理种群的小管福寿螺、斑点福寿螺和Pomacea sp.中分别扩增出1 238、901和571 bp的特异性条带,阴性对照无条带;退火温度为60℃时,32个扩增循环的检测灵敏度可达1 ng样品DNA量。所构建的多重PCR体系可应用于福寿螺不同部位组织碎片、不同性别及不同发育阶段样品的鉴别,具有准确快速、灵敏高效的特点,可用于植保检疫及食品安全部门福寿螺种类的检测。

关 键 词:福寿螺  特异性引物  分子鉴别  线粒体基因  多重PCR
收稿时间:2018-07-09

Multiplex PCR detection of alien invasive apple snails introduced to China
He Chao,Yang Qianqian,Liu Suwen,Liu Guangfu and Yu Xiaoping. Multiplex PCR detection of alien invasive apple snails introduced to China[J]. Acta Phytophylacica Sinica, 2019, 46(1): 97-105
Authors:He Chao  Yang Qianqian  Liu Suwen  Liu Guangfu  Yu Xiaoping
Affiliation:Zhejiang Provincial Key Laboratory of Biometrology and Inspection and Quarantine, College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, Zhejiang Province, China,Zhejiang Provincial Key Laboratory of Biometrology and Inspection and Quarantine, College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, Zhejiang Province, China,Zhejiang Provincial Key Laboratory of Biometrology and Inspection and Quarantine, College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, Zhejiang Province, China,Zhejiang Provincial Key Laboratory of Biometrology and Inspection and Quarantine, College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, Zhejiang Province, China and Zhejiang Provincial Key Laboratory of Biometrology and Inspection and Quarantine, College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, Zhejiang Province, China
Abstract:
Keywords:apple snail  species-specific primer  molecular diagnosis  mitochondrial gene  multiplex PCR
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