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链霉菌高拷贝质粒pIJ101 DNA的研究 Ⅱ.在大肠杆菌中具有终止子活性片段的克隆和分析
引用本文:邓子新,Tobias Kieser,David A.Hopwood. 链霉菌高拷贝质粒pIJ101 DNA的研究 Ⅱ.在大肠杆菌中具有终止子活性片段的克隆和分析[J]. 华中农业大学学报, 1990, 0(2)
作者姓名:邓子新  Tobias Kieser  David A.Hopwood
作者单位:华中农业大学生物技术中心,John Innes Institute,England,John Innes Institute,England 武汉,430070
摘    要:在大肠杆菌的终止子探针载体pIJ667上,neo基因的正常表达可使寄主产生较强的卡那霉索抗性。然而,把链霉菌高拷贝质粒pIJ101上的BclⅠ片段克隆到这个载体的BglⅡ位点,使neo的结构基因与其启动子隔开所做的克隆试验显示,有两个插入片段,BclⅠ-A和BclⅠ-E,可以有效地终止neo基因的转录,使大肠杆菌寄主对卡那霉素呈现敏感。这两个片段在pIJ101的限制性内切酶图谱上已得到了定位,其活性区域的大小分别为2.9和1.19kb。把pIJ101衍生的小质粒pIJ350上BclⅠ片段克隆到pIJ667中,不仅进一步暗示出pIJ101 BclⅠ-A片段上终止子功能的存在,而且把这个区域缩小到1.32kb的范围内。此外,这些终止子活性的表达显示出明显的方向性。

关 键 词:基因融合  异源基因表达  质粒  终止子探针载体

STUDIES ON THE MULTICOPY STREPTOMYCES PLASMID pIJl01 I.Cloning and analysis of the terminator-active fragments in Escherichia coli
Deng Zixin. STUDIES ON THE MULTICOPY STREPTOMYCES PLASMID pIJl01 I.Cloning and analysis of the terminator-active fragments in Escherichia coli[J]. Journal of Huazhong Agricultural University, 1990, 0(2)
Authors:Deng Zixin
Abstract:
Keywords:gene fusion  heterologous gene expression  plasmid  terminator-probe vector
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