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晋麦47幼苗中一个水分胁迫应答蛋白的SDS-PAGE和Nano LC-MS/MS鉴定
引用本文:范锋贵,张晓科,任万杰,王晓龙,叶 石,付晓洁,王宏礼,朱建楚.晋麦47幼苗中一个水分胁迫应答蛋白的SDS-PAGE和Nano LC-MS/MS鉴定[J].麦类作物学报,2012,32(6):1161-1166.
作者姓名:范锋贵  张晓科  任万杰  王晓龙  叶 石  付晓洁  王宏礼  朱建楚
作者单位:西北农林科技大学农学院/国家小麦改良中心杨凌分中心,陕西杨凌,712100
基金项目:国家自然科学基金项目(30971770)。
摘    要:水分胁迫应答蛋白的表达与小麦品种的抗旱性密切相关。为了明确与抗旱相关的水分胁迫D-应答蛋白的表达特点及蛋白组成,对小麦品种晋麦47幼苗进行不同供水量处理,应用SDS-PAGE、纳升级液相色谱-电喷雾串联质谱联用技术(Nano LC-MS/MS),分析了水分胁迫D-应答蛋白条带表达量的变化和蛋白组成。SDS-PAGE检测结果表明,水分胁迫D-应答蛋白条带在-0.5 MPa PEG-6000水溶液胁迫下,6 h出现可见表达,胁迫至48 h时表达量最大,之后,此蛋白条带的表达量又逐渐下降;幼苗胁迫48 h后恢复正常供水,复水72 h后该蛋白消失。切取正常供水和胁迫处理两个条件下SDS-PAGE胶差异表达蛋白条带,经质谱分析分别获得两个阳性结果,且正常供水和PEG-6000胁迫两种处理条件下D-应答蛋白组成一致,均由核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基和磷酸甘油酸变位酶组成(P<0.05);PEG-6000胁迫条件下两个蛋白(亚基)的鉴定得分分别为1 632和88,覆盖率分别为30%和21%;在鉴定的肽段中,有65个肽段同属于核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基,其中35个肽段可信度均超过阈值分数;有5个肽段同属于磷酸甘油酸变位酶,其中4个肽段的可信度超过阈值分数。结果表明该蛋白条带可能主要由核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基等组成。

关 键 词:小麦  水分胁迫  应答蛋白  LC-MS/MS

Identification of a Response Protein in Seedling of Wheat Cultivar Jinmai 47 under Water Stress by SDS-PAGE and LC-MS/MS
FAN Feng-gui,ZHANG Xiao-ke,REN Wan-jie,WANG Xiao-long,YE Shi,FU Xiao-jie,WANG Hong-li,ZHU Jian-chu.Identification of a Response Protein in Seedling of Wheat Cultivar Jinmai 47 under Water Stress by SDS-PAGE and LC-MS/MS[J].Journal of Triticeae Crops,2012,32(6):1161-1166.
Authors:FAN Feng-gui  ZHANG Xiao-ke  REN Wan-jie  WANG Xiao-long  YE Shi  FU Xiao-jie  WANG Hong-li  ZHU Jian-chu
Institution:(College of Agronomy,Northwest A&F University/Yangling Sub-Center of National Wheat Improvement Center,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Wheat  Water stress  Response protein  LC-MS/MS
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