类法尼醇X受体α基因的原核表达及多克隆抗体制备

根据NCBI上公布的序列设计引物,从Hep G2细胞系中克隆了FXRα的开放阅读框(ORF),构建原核表达载体p ET-28a-FXRα,转化E.coli BL21(DE3),经1.0 mmol·L-1IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,成功诱导FXRα蛋白;以镍柱亲和层析纯化获得FXRα蛋白,免疫家兔,制备多克隆抗体。Western Blot分析表明:制备的多克隆抗体能够特异识别重组蛋白,为深入研究此受体的功能及新药发现奠定了基础。