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用荧光定量RT-PCR方法分析B型和ZHJ-1型烟粉虱热休克基因hsp70和hsp90的表达
引用本文:王海鸿,雷仲仁. 用荧光定量RT-PCR方法分析B型和ZHJ-1型烟粉虱热休克基因hsp70和hsp90的表达[J]. 中国农业科学, 2008, 41(11): 3636-3644. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.025
作者姓名:王海鸿  雷仲仁
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室
基金项目:国家"973"项目  
摘    要:【目的】比较温度胁迫对两种生物型烟粉虱体内hsps诱导表达的差异。【方法】根据烟粉虱hsp70基因、hsp90基因和18S rRNA序列,设计并合成引物用于实时定量RT-PCR,扩增产物连接到质粒pMD18-T载体上,重组质粒经筛选、签定和10×梯度稀释后作为模板,用于标准曲线的制作和样品检测,检测温度胁迫对B型和ZHJ-1型烟粉虱hsp70和hsp90 mRNA转录水平的诱导情况。【结果】在受到34℃、37℃、40℃和43℃的高温胁迫时,两者hsps的诱导水平无显著差异(P>0.05);在受到4℃、7℃、10℃和13℃的低温胁迫时,B型烟粉虱体内hsps的诱导表达水平显著超过了ZHJ-1型烟粉虱(P<0.05)。【结论】经检验所建立的荧光定量RT-PCR体系特异性好,灵敏度高,符合检测烟粉虱hsps mRNA转录水平的要求。低温胁迫下B型烟粉虱体内hsps的高表达可能是其较强的耐受低温能力的主要机制之一。

关 键 词:烟粉虱  热休克基因  SYBRGreenI  荧光定量RT-PCR  温度胁迫  
收稿时间:2007-12-04

Detection of hsp 70 and hsp90 Transcription in Bemisia tabaci (B and ZHJ-1 Biotype) by Fluorescence Quantitative RT-PCR
WANG Hai-hong,LEI Zhong-ren. Detection of hsp 70 and hsp90 Transcription in Bemisia tabaci (B and ZHJ-1 Biotype) by Fluorescence Quantitative RT-PCR[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2008, 41(11): 3636-3644. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.025
Authors:WANG Hai-hong  LEI Zhong-ren
Abstract:
Keywords:SYBR Green I
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