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蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达
引用本文:眭顺照,李名扬,蒋安,王洋,秦华,皮伟,任琛. 蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达[J]. 中国农业科学, 2007, 40(3): 644-648
作者姓名:眭顺照  李名扬  蒋安  王洋  秦华  皮伟  任琛
作者单位:西南大学园艺园林学院, 西南大学花卉研究所
基金项目:重庆市自然科学基金;重庆市教委资助项目
摘    要:【目的】构建蜡梅花cDNA文库,分析蜡梅脂转移蛋白基因的表达,为探索蜡梅冬季开花分子机理,分离克隆特色基因奠定基础。【方法】以蜡梅花器官为材料,用SMART cDNA Library Construction Kit 构建文库,RT-PCR分析基因表达。【结果】经测定原始文库滴度达到1.4×106 pfu/ml,扩增总文库滴度约为1010pfu/ml,重组率达到96%,插入片段在0.5 kb 以上,平均约1.1 kb,通过PCR 检测,从总文库中检测到了表达丰度不同的蜡梅PI、AP3和LTP基因的特异片段,说明所构建的文库覆盖度高、代表性强,LTP基因具有内含子,而总文库中扩增出的LTP基因不含内含子,说明所构建的cDNA文库无基因组DNA污染, LTP基因在蜡梅开花各个时期均表现较高的转录水平,与EST分析时高频率出现LTP序列的情况相符,证实所构建的文库能够反映蜡梅开花过程基因表达的基本情况。【结论】已获得高质量的蜡梅花cDNA文库,可以用于进一步的基因克隆或EST测序分析,这是首次正式报道蜡梅cDNA文库的构建。LTP基因在蜡梅开花过程中可能具有重要的生物学功能,为探索蜡梅冬季开花分子机理提供了线索。

关 键 词:蜡梅  cDNA文库  脂转移蛋白基因  RT-PCR
收稿时间:2006-03-22
修稿时间:2006-03-24

Construction of Chimonanthus praecox Flower cDNA Library and Expression Analysis of High-Abundancy cDNA of Lipid Transfer Protein (LTP)
SUI Shun-zhao,LI Ming-yang,JIANG An,WANG Yang,QIN Hua,PI Wei,REN Chen. Construction of Chimonanthus praecox Flower cDNA Library and Expression Analysis of High-Abundancy cDNA of Lipid Transfer Protein (LTP)[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2007, 40(3): 644-648
Authors:SUI Shun-zhao  LI Ming-yang  JIANG An  WANG Yang  QIN Hua  PI Wei  REN Chen
Affiliation:College of Horticulture and Landscape, Institute of Ornamental Research, Southwest University, Chongqing 400716
Abstract:
Keywords:RT-PCR
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