| 鸭瘟病毒gB蛋白单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 赵丹丹,刁有祥,杨国平,等. 鸭瘟病毒gB蛋白单克隆抗体的制备[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(10): 7-11 |
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| 作者姓名： | 赵丹丹 刁有祥 杨国平 等 |
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| 作者单位： | 山东农业大学 动物科技学院,山东农业大学 动物科技学院,山东农业大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系项目（CARS-43） |
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| 摘 要： | 【目的】制备鸭瘟病毒(DPV)gB蛋白单克隆抗体,为建立DPV快速诊断方法及进一步鉴定DPV的抗原表位奠定基础。【方法】克隆DPVgB基因,构建其表达载体并进行原核表达,纯化DPV gB蛋白,以其作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,进行间接ELISA及亚克隆筛选,并对单抗亚类及抗原性进行鉴定。【结果】PCR扩增出915bp的目的基因,成功连接于pET-28a载体,并转化大肠杆菌Rosetta进行诱导表达,获得4株稳定分泌抗DPV gB蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为A8D7、E6C3、H11F8、H6F6,间接ELISA检测其腹水效价分别为1∶103、1∶103、1∶105、1∶103,亚类鉴定结果分别为IgG2b、IgG2a、IgG2b、IgG1,轻链均为kappa链。Western blot结果显示4株单抗均能与DPV gB蛋白特异性结合,IFA结果表明4株单抗是针对DPV产生的。【结论】成功获得了特异性针对DPV gB蛋白的单克隆抗体。
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| 关 键 词： | 鸭瘟病毒；gB蛋白；单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2014-04-20 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against gB protein of duck plague virus |
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| ZHAO Dandan,DIAO Youxiang and YANG Guoping,et al. Preparation and identification of monoclonal antibodies against gB protein of duck plague virus[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2016, 44(10): 7-11 |
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| Authors: | ZHAO Dandan DIAO Youxiang YANG Guoping et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | duck plague virus gB protein monoclonal antibody |
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