| 草莓果实特异表达基因annfaf在E.coli中的表达及抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 王关林,夏然,方宏筠,杨怀义,那杰. 草莓果实特异表达基因annfaf在E.coli中的表达及抗血清的制备[J]. 农业生物技术学报, 2003, 11(2): 140-143 |
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| 作者姓名： | 王关林 夏然 方宏筠 杨怀义 那杰 |
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| 作者单位： | 1. 辽宁师范大学生命科学学院,大连,116029
2. 中国科学院微生物研究所,北京,100080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30170488). |
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| 摘 要： | 将草莓(Fragaria ananassa Duch．)果实中特异表达的膜联蛋白基因annfaf的cDNA连接重组到pET-30a质粒中，构建了融合和非融合蛋白表达载体。annfaf基因转化大肠杆菌(E.coli)后以包含体形式得到了高效表达，同时研究了annfaf基因表达的影响因素。实验结果表明，最佳培养温度是37℃，培养时间为4h，当培养液中加入利福霉素时可明显提高表达量中目的蛋白的含量。SDS—PAGE检测表明该蛋白分子量为35kD，与目的蛋白相同。以表达的蛋白作抗原免疫家兔，制备了抗Annfaf蛋白的抗血清。ELISA检测及Western印迹表明，制备的抗血清可与其免疫抗原发生特异的免疫学反应，且具有较高的效价。该实验结果为进一步研究Annfaf蛋白在草莓果实细胞中的定位及其生理功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 草莓 果实特异表达基因 E.coli 表达 抗血清制备 |
| 修稿时间： | 2002-04-25 |
Expression of annfaf Gene Expressed Specifically in Strawberry Fruit in E. coli and Preparation of Its Antiserum |
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