丹参胚性愈伤组织的诱导和细胞大量培养体系的建立

为建立丹参的胚性愈伤组织诱导体系和细胞快速生长体系,用于丹参离体药物生产和体细胞诱变育种,本研究通过不同外植体、不同激素的配比、胚性愈伤组织诱导,继代培养的研究,筛选出细胞生长速度最快、质量最好的培养基配方。研究结果显示,根系和茎段更容易形成愈伤组织。然而,从叶片与茎段诱导出的愈伤组织质地较硬、数量较少,生长缓慢,容易老化,内部褐变并木栓化。从根的伤口诱导的愈伤组织质地松散、数量多、生长旺盛,为黄绿色。因此,选择根系作为丹参愈伤组织药用成分生产的外植体。另外,松散型愈伤组织的初代和继代培养细胞生长快,需要在适当的BA与2,4-D配比中获得。本试验中丹参细胞培养的初代培养的最佳配方为:MS+0.5 mg·L~(-1)BA+0.5mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖,继代培养的最佳培养基配方为:MS+1.0 mg·L~(-1)BA+1.0 mg·L~(-1)2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖。