| CRISPR-Cas9系统敲除亚麻FAD2基因表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张喻,江海霞,闫文亮,郭栋良,杨亮杰,叶佳丽,王玥,谢丽琼. CRISPR-Cas9系统敲除亚麻FAD2基因表达载体的构建[J]. 分子植物育种, 2019, 17(7): 2185-2192 |
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| 作者姓名： | 张喻 江海霞 闫文亮 郭栋良 杨亮杰 叶佳丽 王玥 谢丽琼 |
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| 作者单位： | 新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046 |
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| 基金项目： | 高等学校科研项目;国家自然科学基金;国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划 |
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| 摘 要： | CRISPR/Cas9系统是一种新型基因编辑工具,准确编辑目标基因,广泛应用于动植物的基因编辑中。本实验构建了油用亚麻品种‘陇亚10号’FAD2基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体,以CRISPR/Cas9基因编辑技术为切入点,根据Gene Bank中公布的FAD2基因序列(DQ222824.1)在FAD2基因外显子部分运用sg RNA在线设计软件CRISPR-P 2.0对亚麻FAD2基因做脱靶分析,在外显子区域选取2个片段作为靶序列进行敲除。以潮霉素作为筛选标记,采用Golden Gate cloning法构建针对‘陇亚10号’FAD2基因的CRISPR/Cas9基因敲除载体,命名为p YLCRISPR/Cas9-FAD2。将pYLCRISPR/Cas9-FAD2载体导入农杆菌并检测其稳定性,保存菌种以便后期利用农杆菌介导法转化‘陇亚10号’,为深入研究亚麻FAD2基因的功能提供参考。
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| 关 键 词： | 亚麻 FAD2 CRISPR/Cas9 基因编辑 |
Construction of Expression Vector for Knocking out FAD2 Gene in Flax by CRISPR/Cas9 System |
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| Zhang Yu,Jiang Haixia,Yan Wenliang,Guo Dongliang,Yang Liangjie,Ye Jiali,Wang Yue,Xie Liqiong. Construction of Expression Vector for Knocking out FAD2 Gene in Flax by CRISPR/Cas9 System[J]. Molecular Plant Breeding, 2019, 17(7): 2185-2192 |
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| Authors: | Zhang Yu Jiang Haixia Yan Wenliang Guo Dongliang Yang Liangjie Ye Jiali Wang Yue Xie Liqiong |
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| Affiliation: | (College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi, 830046) |
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| Abstract: | Zhang Yu;Jiang Haixia;Yan Wenliang;Guo Dongliang;Yang Liangjie;Ye Jiali;Wang Yue;Xie Liqiong(College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi, 830046) |
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| Keywords: | Flax(Linum usitatissimum) FAD2 CRISPR/Cas9 Gene editing |
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