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云南草果SSR-PCR反应体系的优化及引物的筛选
引用本文:胡一凡,狄义宁,张雪梅,杨志清.云南草果SSR-PCR反应体系的优化及引物的筛选[J].分子植物育种,2019,17(1):195-200.
作者姓名:胡一凡  狄义宁  张雪梅  杨志清
作者单位:云南农业大学农学与生物技术学院,昆明,650201;云南农业大学农学与生物技术学院,昆明,650201;云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室,昆明,650201;云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心,昆明,650201;云南省芳香生物工程技术研究中心,昆明,650201
基金项目:国家自然科学基金;云南省社会发展科技计划;云南省科技惠民计划;云南省科技计划
摘    要:草果为药食两用的草本植物,近年来在市场上供不应求,但关于草果居群的分子鉴定及种质资源的研究极为稀少。为使云南草果产业更加健康和可持续的发展,本实验对云南草果进行了SSR-PCR反应体系的优化及引物的筛选,为研究草果遗传多样性提供了依据。实验采用L16(43)正交试验设计,对PCR反应体系中的3个因素(2×Taq PCR Starmix,引物, DNA模板)进行优化,并利用单因素分析法,对PCR退火温度、PCR扩增产物点样量进行实验与分析。最终确定5个因素的最佳水平,即DNA模板(50 ng/μL) 2μL,2×Taq PCR StartMix 6μL,正反引物(10μmol/L)各1.5μL,dd H2O补足至20μL (即加入ddH2O 9μL),PCR产物点样量可以选择在1.5~2μL之间。从48对SSR引物中筛选出了7对扩增结果好的引物。7个SSR引物可用于草果资源的遗传多样性研究,为分子技术研究提供了科学依据。

关 键 词:草果  反应体系优化  SSR引物筛选

Optimization of SSR-PCR System and Primers Screening of Amomum tsao-ko Crevost et Lemarie in Yunnan
Hu Yifan,Di Yining,Zhang Xuemei,Yang Zhiqing.Optimization of SSR-PCR System and Primers Screening of Amomum tsao-ko Crevost et Lemarie in Yunnan[J].Molecular Plant Breeding,2019,17(1):195-200.
Authors:Hu Yifan  Di Yining  Zhang Xuemei  Yang Zhiqing
Institution:(College of Agronomy and Bioteehnology,Yunnan Agricultural University,Kunming,650201;The Key Laboratory of Medicinal Plant Biology of Yurman Province,Yunnan Agriculitural University,Kunming,650201;National and Local Joint Engineering Research Center on Germplasm Innovation and Utilization of Chinese Medicinal Materials in South Western China,Yunnan Agricultural University,Kunming,650201;Yunhan Engineering Technology Research Center for Aromatic Biology,Kunming,650201)
Abstract:Hu Yifan;Di Yining;Zhang Xuemei;Yang Zhiqing(College of Agronomy and Bioteehnology,Yunnan Agricultural University,Kunming,650201;The Key Laboratory of Medicinal Plant Biology of Yurman Province,Yunnan Agriculitural University,Kunming,650201;National and Local Joint Engineering Research Center on Germplasm Innovation and Utilization of Chinese Medicinal Materials in South Western China,Yunnan Agricultural University,Kunming,650201;Yunhan Engineering Technology Research Center for Aromatic Biology,Kunming,650201)
Keywords:A momum tsao-ko Crevost et Lemarie  DNA extraction  SSR primer Screening
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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