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荔枝基因枪转化及其GUS瞬时表达研究
引用本文:桑庆亮,赖钟雄,林玉玲,陈裕坤. 荔枝基因枪转化及其GUS瞬时表达研究[J]. 热带作物学报, 2014, 35(11): 2223-2229
作者姓名:桑庆亮  赖钟雄  林玉玲  陈裕坤
作者单位:1. 福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州 350002 ;泉州师范学院化学与生命科学学院,福建泉州 362000
2. 福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州,350002
基金项目:国家教育部霍英东教育基金会高等学校青年教师基金(No. 71026);国家自然科学基金(No. 39870544);国家“948”计划(No. 991029)资助项目的部分内容。
摘    要:以幼胚来源的荔枝EC作为受体材料,采用基因枪轰击的方法将外源gus基因转入荔枝,并对不同条件下的GUS瞬时表达进行了详细研究。结果表明:在其它参数不变的条件下,轰击距离、真空度、可裂膜片压力、金粉用量、质粒DNA用量等理化参数显著影响GUS瞬时表达;渗透处理可显著促进GUS瞬时表达。因此,荔枝EC基因枪转化的适宜条件为在轰击距离6 cm、真空度84.66 k Pa、可裂膜片压力7 584.23 k Pa、轰击1次的情况下,每次轰击用1μg质粒DNA包裹600μg金粉对事先用0.25 mol/L前处理4 h的荔枝EC轰击,并在轰击后渗透处理20 h。另外,经50 mg/L潮霉素筛选得到荔枝抗性愈伤组织,并通过体胚发生途径获再生植株,且GUS染色显示获得了稳定表达GUS蛋白的细胞系和植株。

关 键 词:荔枝  胚性愈伤组织  基因枪  遗传转化  瞬时表达

Transformation Using Particle Bombardment and Its GUS Transient Expression Assay in Litchi chinensis Sonn.
SANG Qingliang,LAI Zhongxiong,LIN Yuling and CHEN Yukun. Transformation Using Particle Bombardment and Its GUS Transient Expression Assay in Litchi chinensis Sonn.[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2014, 35(11): 2223-2229
Authors:SANG Qingliang  LAI Zhongxiong  LIN Yuling  CHEN Yukun
Affiliation:1 Institute of Horticultural Biotechnology, Fujian Agriculture and Forestry University 2 School of Chemistry and Life Science, Quanzhou Normal University;Institute of Horticultural Biotechnology, Fujian Agriculture and Forestry University;Institute of Horticultural Biotechnology, Fujian Agriculture and Forestry University;Institute of Horticultural Biotechnology, Fujian Agriculture and Forestry University
Abstract:
Keywords:Litchi chinensis Sonn.   Embryonic calli   Particle bombardment   Genetic transformation   Transient expression
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