| 漾濞泡核桃ISSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 周林涛,陆 斌,周 军,等. 漾濞泡核桃ISSR-PCR反应体系的建立和优化[J]. 林业调查规划, 2014, 0(1): 14-17 |
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| 作者姓名： | 周林涛 陆 斌 周 军 等 |
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| 作者单位： | [1]西南林业大学,云南昆明650224 [2]云南省林业有害生物防治检疫局,云南昆明650051 [3]云南省林业技术推广总站,云南昆明650224 |
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| 基金项目： | 国家“十二五”科技支撑项目“核桃和长山核桃高效生产关键技术研究与示范”（2013BAD14B01）。 |
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| 摘 要： | 以漾濞泡核桃优株为研究对象,研究其ISSR-PCR反应体系中的5个影响因子(模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度)对PCR扩增效果的影响,从而建立起漾濞泡核桃的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明:模板DNA最佳浓度为50 ng/(25μL),Taq聚合酶浓度为0.75U/(25μL),引物浓度为0.7mmol/L,dNTPs浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.0mmol/L,利用该最佳体系对试验中所选取的样本进行扩增反应。建立了适宜于漾濞泡核桃的ISSR-PCR扩增的最佳体系,该体系的建立为利用ISSR分子标记技术对漾濞泡核桃进行种质资源研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 漾濞泡核桃 ISSR-PCR反应体系 正交优化 扩增效果 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System on Juglans sigillata |
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| ZHOU Lin-tao,LU Bin,ZHOU Jun,SU Wei-geng,YUAN Xiao-long,MENG Fu-xuan. Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System on Juglans sigillata[J]. Forest Inventory and Planning, 2014, 0(1): 14-17 |
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| Authors: | ZHOU Lin-tao LU Bin ZHOU Jun SU Wei-geng YUAN Xiao-long MENG Fu-xuan |
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| Affiliation: | 1. Southwest Forestry University, Kunming 650224, China; 2. Yunnan Forest Pest Control and Quarantine Bureau, Kunming 650051, China 3. Yunnan Provincial Forestry Technology Extension Station, Kunming 650224, China) |
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| Abstract: | The effects of template DNA concentrations , Taq DNA polymerase concentrations , primers concentrations , dNTPs and Mg2＋concentrations in ISSR-PCR reaction system on PCR amplification have been studied , and optimum ISSR-PCR reaction system was set up.Results showed that the most suitable concentrations of template DNA, Taq DNA polymerase, primers, dNTPs and Mg2＋ were 50ng/（25μL）, 0.75U/（25μL）, 0.7mmol/L, 0.20mmol/L and 2.0mmol/L respectively.The optimal IS-SR-PCR reaction system for Juglans sigillata established in this research provides a basis for using ISSR molecular marker technology to study the germplasm resources of Juglans sigillata. |
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| Keywords: | Juglans sigillata ISSR-PCR reaction system orthogonal optimization amplification effect |
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