Failure to Remove Bovine Diarrhea Virus (BVDV) from Bull Semen by Swim up and other Separatory Sperm Techniques Associated with in vitro Fertilization

Semen samples, collected from bulls pesistently infected with bovine viral diarrhea virus (BVDV) and containing BVDV (titer 10⁵ - 10⁶TCID₅₀/ml), were subjected to sperm separation procedures (washing, swim up, Percoll gradient, glass wool filtration, glass beads filtration) that are commonly used prior to in vitro fertilization (IVF) to determine if these procedures would yield spermatozoa free from BVDV. The final sperm pellets from frozen and fresh ejaculates were tested for the presence of BVDV by the immunoperoxidase technique; all tests were positive for BVDV in the range of 10³ - 10⁴TCID₅₀/ml). The study shows that when semen containing BVDV at the level of 10⁵ - 10⁶TCID₅₀/ml) is used for IVF, the virus is not completely removed by any of the simple physical methods commonly used to prepare sperm for IVF. Inhalt: Feldversuch das bovine Diarrhoe Virus (BVDV) aus Bullensperma durch Swim up oder andere Trennverfahren in Verbindung mit der In vitro Fertilisation zu entfernen Spermaproben, die von Bullen gewonnen wurden, welche dauerhaft mit dem Virus der bovinen Virus-Diarrhoe (BVDV) infiziert waren und einen Titer zwischen 10⁵ - 10⁶TCID₅₀/ml enthielten, wurden verschiedenen Trennverfahren unterzogen (Waschen, swim up, Percoll gradient, Glaswollenfiltration, Glaskugelfiltration). Diese Verfahren werden üblicherweise für die Vorbereitung zur In vitro Befruchtung verwendet, und es sollte geprüft werden, ob diese Verfahren auch das Sperma von dem BVD-Virus befreien können. Das endgültige Spermapellet von gefrorenen/aufgetauten und frischen Ejakulaten wurde in Gegenwart des BVD-Virus und mit Hilfe der immunoperoxidase Technik getestet. Alle Testergebnisse waren positiv für BVD-Virus in einem Bereich von 10³ - 10⁴ TCID₅₀/ml. Die Studie zeigt, daß Sperma, wenn es 10⁵-10⁶TCID₅₀/ml des Virus enhält, nicht vollständig mit den für die IVF üblichen, einfachen physikalischen Methoden von dem Virus befeit werden kann.