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| 番茄环纹斑点病毒核壳体蛋白抗血清制备及其血清学特性分析 | |
| 引用本文： | 尹跃艳,董家红,程晓非,李婷婷,丁铭,方琦,张仲凯. 番茄环纹斑点病毒核壳体蛋白抗血清制备及其血清学特性分析[J]. 植物病理学报, 2011, 41(5): 482-485 |
| 作者姓名： | 尹跃艳 董家红 程晓非 李婷婷 丁铭 方琦 张仲凯 |
| 作者单位： | 1. 云南省农业生物技术重点实验室,昆明650223;云南省农业科学院高山经济植物研究所,丽江674100 2. 云南省农业生物技术重点实验室,昆明650223;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,昆明650223 3. 云南省农业生物技术重点实验室,昆明,650223 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，“973”前期研究专项 |
| 摘 要： | 番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus, TZSV)是番茄斑萎病毒属的一个新种,对云南番茄、辣椒生产造成严重危害。用RT-PCR 从感病番茄中扩增得到长度为837 bp TZSV 的核壳体蛋白基因(N 基因),将其克隆到原核表达载体pET-28a( + ),获得重组原核表达载体pET-TZSV-N,在大肠杆菌BL21 中表达,SDS-PAGE 分析表明,该载体高效表达33kDa 的融合蛋白;以纯化的融合蛋白作为抗原免疫家兔制备TZSV 核壳体蛋白(N 蛋白)的多克隆抗体,间接酶联免疫测定(ID-ELISA)表明效价为1 / 6 000;Western blot 分析表明,该抗血清能与西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)血清组的辣椒褪绿病毒(CaCV)反应,而与番茄斑萎病毒(TSWV)、凤仙花坏死斑病毒(INSV)无血清交叉反应,说明获得的抗血清能用于WS-MoV 血清组成员的检测,TZSV 属于WSMoV 血清组成员。 |
| 关 键 词： | 番茄环纹斑点病毒 核壳体蛋白 原核表达 血清学相关性 |
Antiserum preparation and serological characterization of the nucleocapsid protein of Tomato zonate spot virus |
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| YIN Yue-yan,DONG Jia-hong,CHENG Xiao-fei,LI Ting-ting,DING Ming,FANG Qi,ZHANG Zhong-kai. Antiserum preparation and serological characterization of the nucleocapsid protein of Tomato zonate spot virus[J]. Acta Phytopathologica Sinica, 2011, 41(5): 482-485 | |
| Authors: | YIN Yue-yan DONG Jia-hong CHENG Xiao-fei LI Ting-ting DING Ming FANG Qi ZHANG Zhong-kai |
| Affiliation: | YIN Yue-yan1,3,DONG Jia-hong1,2,CHENG Xiao-fei1,LI Ting-ting1,DING Ming1,FANG Qi1,ZHANG Zhong-kai1,2(1Yunnan Province Key Laboratory of Agricultural Biotechnology,Kunming 650223,China,2Institute of Biotechnology and Germplasm Resources,Yunnan Academy of Agricultural Sciences,3Institute of Alpine Economic Plant,Lijiang 674100,China) |
| Abstract: | Tomato zonate spot virus(TZSV),a new species of Tospovirus,was a serious constraint to tomato and chili production.The nucleocapsid protein gene(837 bp) of TZSV was amplified by RT-PCR,and cloned into vector pET-28a for prokaryotic expression.The recombinant plasmid of pET-TZSV-N was obtained and transformed into Escherichia coli BL21.The result of SDS-PAGE showed 33 kDa fusion protein was expressed in high level.The fusion protein was purified and used as antigen to prepare the polyclonal antiserum in rabb... |
| Keywords: | TZSV nucleocapsid protein prokaryotic expression serological relationship |
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