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| 牛轮状病毒VP7基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 魏锁成,巩转娣,车团结,田风林.牛轮状病毒VP7基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(2):151-154. |
| 作者姓名： | 魏锁成 巩转娣 车团结 田风林 |
| 作者单位： | 1. 西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,7300030 2. 西北民族大学医学院附属医院,甘肃兰州,730030 3. 兰州百源基因技术有限公司,甘肃兰州,730000 |
| 基金项目： | 2007年甘肃省科技支撑计划项目(0708NKCA079);甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW-2010-10) |
| 摘 要： | 为建立快速特异的定量检测牛轮状病毒(BRV) VP7基因的荧光定量PCR检测方法,本研究设计扩增BRV VP7基因的特异性引物,将扩增的VP7基因片段(342 bp)克隆于pMD 18-T载体中(pMD-VP7),作为重组质粒标准品,建立EvaGreen荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法.经反应条件优化,结果表明该方法的最低检测量为8.03拷贝/μL.该方法对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、猪流行性腹泻病毒及牛结核分枝杆菌的检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性.批内和批间重复变异系数均小于3％.采用该方法对12份ELISA阳性样本检测出10份阳性,符合率83.33％.本研究建立的BVR VP7 qRT-PCR检测方法具有特异、灵敏、快速和对标本的检测能力较强等特点,可以用于临床诊断和流行病学调查. |
| 关 键 词： | 轮状病毒 VP7基因 实时荧光定量PCR |
Establishment of real-time PCR for detecting VP7 gene of bovine rotavirus |
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| WEI Suo-cheng , GONG Zhuan-di , CHE Tuan-jie , TIAN Feng-lin.Establishment of real-time PCR for detecting VP7 gene of bovine rotavirus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(2):151-154. | |
| Authors: | WEI Suo-cheng GONG Zhuan-di CHE Tuan-jie TIAN Feng-lin |
| Institution: | 1(1.Life Science and Engineering College of Northwest University for Nationalities,Lanzhou 730030,China;2.Medicine College of Northwest University for Nationalities,Lanzhou 730030,China;3.Baiyuan Company for Gene Technology,Lanzhou 730000,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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