| 家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析 |
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| 引用本文： | 牛伟涛,李珊珊,聂作明,陈健,吕正兵,王丹,吴燕,吴怡,高攀,于威,盛清,沈红丹,张耀洲.家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析[J].蚕业科学,2009,35(2). |
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| 作者姓名： | 牛伟涛 李珊珊 聂作明 陈健 吕正兵 王丹 吴燕 吴怡 高攀 于威 盛清 沈红丹 张耀洲 |
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| 作者单位： | 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所,浙江家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州,310018;浙江理工大学生命科学学院生物技术系,杭州,310018 |
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| 基金项目： | 浙江省新苗计划项目，国家重点基础研究发展规划(973计划)，国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 从已构建的家蚕蛹期cDNA文库中筛选得到一条新的cDNA片断,经生物信息学分析发现其编码框具有脂质运载蛋白(lipocalin)保守结构域,命名为BmLip32基因,GenBank登录号为FJ602775。构建融合表达质粒pET-28a-BmLip32后转化大肠杆菌BL21并诱导表达,将纯化的His-BmLip32融合蛋白免疫新西兰大白兔成功制备多克隆抗体,效价大于1∶12 800。RT-PCR检测结果表明BmLip32在家蚕蛹期转录水平最高,在5龄幼虫头部中的转录水平明显高于其它组织。Western blotting分析结果显示BmLip32在5龄幼虫头部大量表达。免疫细胞化学实验显示BmLip32蛋白存在于家蚕Bm5细胞的细胞质中。推测BmLip32基因是家蚕神经系统发育相关的重要调控基因。
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| 关 键 词： | 家蚕 BmLip32基因 表达活性 实时荧光定量PCR 免疫印迹 免疫细胞化学 |
Molecular Characteristics and Expression Analysis of Lipocalin Gene BmLip32 in Bombyx mori |
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| NIU Wei-Tao,LI Shan-Shan,NIE Zuo-Ming,CHEN Jian,LU Zheng-Bing,WANG Dan,WU Yan,WU Yi,GAO Pan,YU Wei,SHENG Qing,SHEN Hong-Dan,ZHANG Yao-Zhou.Molecular Characteristics and Expression Analysis of Lipocalin Gene BmLip32 in Bombyx mori[J].Acta Sericologica Sinica,2009,35(2). |
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| Authors: | NIU Wei-Tao LI Shan-Shan NIE Zuo-Ming CHEN Jian LU Zheng-Bing WANG Dan WU Yan WU Yi GAO Pan YU Wei SHENG Qing SHEN Hong-Dan ZHANG Yao-Zhou |
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| Abstract: | A cDNA sequence was obtained through screening in a Bombyx mori cDNA library constructed by our laboratory.Blast searches against NCBI database revealed that its coding regions contained a lipocalin conserved domain.We preliminarily nominated this novel gene as BmLip32(GenBank accession number FJ602775).The BmLip32 ORF was sub-cloned into the prokaryotic expression vector pET-28a and the fusion protein was successfully expressed in Escherichia coli BL21 by IPTG induction.The purified fusion protein His-BmLi... |
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| Keywords: | Bombyx mori BmLip32 gene Expression activity Real-time PCR Western blotting Immunocytochemistry |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
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