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橡胶树白粉病 PMA-qPCR 检测体系及应用
引用本文:官 鑫,涂 敏,蔡海滨,王云月,曾 霞,胡彦师.橡胶树白粉病 PMA-qPCR 检测体系及应用[J].广东农业科学,2022,49(5):102-109.
作者姓名:官 鑫  涂 敏  蔡海滨  王云月  曾 霞  胡彦师
基金项目:国家重点研发计划项目(2019YFD10005002-0303);农业农村部农垦局物种资源保护项目(18220019)
摘    要:【目的】橡胶树白粉病是迄今为止我国橡胶树最重要的叶部病害,通过将叠氮溴化丙啶(PMA) 与实时荧光定量 PCR 技术(qPCR)相结合,构建橡胶树白粉病 PMA-qPCR 检测体系,为及时高效检测橡胶 树白粉菌分生孢子活菌量提供技术支撑。【方法】根据橡胶树白粉菌核糖体内转录间隔区(ITS)序列保守区 设计引物,验证其特异性,以该菌重组质粒 pMD-19T-Eq 绘制标准曲线,建立橡胶树白粉病 PMA-qPCR 检测 体系,对其重复性和灵敏度进行评价,并运用该体系对丙环唑处理橡胶树白粉病病叶后的活菌数进行检测。 【结果】研究设计的引物特异性良好,构建的橡胶树白粉菌 qPCR 标准曲线循环阈值(Ct)与模板浓度呈良 好的线性关系,相关系数为 0.9981,扩增效率为 107.97%。PMA-qPCR 对活孢子悬浮液扩增几乎无影响,检 测灵敏度为 4.77×102 copies/μL。在丙环唑处理橡胶树白粉病 15 min 后,活菌比例从 66.13% 下降至 23.18%。 【结论】PMA-qPCR 检测体系能快速定量检测橡胶树白粉病活菌量,具有灵敏、准确和高效的优点,为该病害 的预测预报及防治效果提供理论依据和技术手段。

关 键 词:橡胶树  白粉病  PMA-qPCR  技术  分生孢子  丙环唑

PMA-qPCR Detection System for Powdery Mildew of Rubber Tree and Its Application
GUAN Xin,TU Min,CAI Haibin,WANG Yunyue,ZENG Xi,HU Yanshi.PMA-qPCR Detection System for Powdery Mildew of Rubber Tree and Its Application[J].Guangdong Agricultural Sciences,2022,49(5):102-109.
Authors:GUAN Xin  TU Min  CAI Haibin  WANG Yunyue  ZENG Xi  HU Yanshi
Abstract:
Keywords:rubber tree  powdery mildew  PMA-qPCR  conidium  propiconazole
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