新西兰白兔毛囊体外培养条件优化及其增殖能力的研究

为建立新西兰白兔毛囊体外培养模型，探究其最适的培养环境，本实验选用2月龄新西兰白兔，采集触须毛囊，分离组织和脂肪，保留完整毛囊。将完整无损的毛囊放入24孔板，每孔1根，加入William’s E、DMEM、MEM3种不同培养基，每组6个重复，每2d在倒置显微镜下观察毛囊毛干的生长，并利用HE和PCNA免疫荧光染色检测毛囊的形态和增殖能力。结果显示：3种培养基中毛囊毛干在体外培养4d后生长减缓，在2 d与4 d时的生长速度均大于6 d(P<0.05)。其中，William’s E组生长速度高于MEM组（P<0.05），且William’s E组生长最快。4 d时，HE染色发现William’s E组毛囊结构完整，毛乳头清晰，而此时DMEM和MEM组毛乳头已经消失。进一步用PCNA免疫荧光染色，发现Williams’E组PCNA在毛乳头阳性表达，DMEM和MEM组毛囊表达仅表达在外根鞘。因此，William’sE培养基最适宜新西兰白兔触须毛囊生长，毛乳头增殖能力最强。