DT40细胞slgM λ轻链基因敲除载体的构建 |
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作者姓名: | 游雷鸣 罗俊 王爱萍 张改平 卜丹 郭亚男 祈艳华 |
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作者单位: | 1. 河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州,450002;郑州大学生物工程系,河南郑州,450001 2. 河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州,450002 3. 郑州大学生物工程系,河南郑州,450001 |
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基金项目: | "十一五"国家科技支撑计划,河南省基础与前沿技术研究计划 |
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摘 要: | 从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆β-actin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建β-octin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框.将克隆的slgM λ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂.PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向slgM λ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR.为建立slgM λ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究slgM λ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础.
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关 键 词: | slgM λ轻链 β-actin启动子 基因敲除 同源重组 |
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