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大鼠胰岛的分离、纯化与评价方法改良
引用本文:曾明华,陈树林,蒋田园. 大鼠胰岛的分离、纯化与评价方法改良[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2008, 36(2): 50-54
作者姓名:曾明华  陈树林  蒋田园
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100
2. 河南省乳品工程技术研究中心,河南,郑州,450008
基金项目:国家自然科学基金 , 陕西省自然科学基金 , 河南省乳品工程技术研究中心科研基金
摘    要:【目的】简化胰岛的分离纯化方法,建立完善的胰岛评价体系。【方法】采用Ⅴ型胶原酶分离出Spra-gue-Dawley大鼠胰岛,并采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛。纯化的胰岛通过双硫腙(Dithi-zone,DTZ)染色进行计数及纯度检测,丫啶橙(AO)-碘化丙啶(PI)双染色法确定分离细胞的存活率,体外葡萄糖刺激释放胰岛素试验检测胰岛的分泌活性。采用Adobe Photoshop程序改进了常规的胰岛计数方法,并进行胰岛标准计数。【结果】平均每只成年Sprague Dawley大鼠的胰腺,可获得(3 840±24)当量数(IEQ)纯化胰岛,纯度可达到90%,细胞平均存活率达92%。【结论】采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法及基于Adobe Photoshop程序的标准计数方法,可分别用于大鼠胰岛分离纯化和计数。

关 键 词:大鼠胰岛  分离纯化  胰岛计数  分泌活性
文章编号:1671-9387(2008)02-0050-05
收稿时间:2007-03-06
修稿时间:2007-03-06

Isolation, purification and assessment of rat pancreas islet
ZENG Ming-hua,CHEN Shu-lin,JIANG Tian-yuan,MAO Hai-peng,PU Qiang-hong,ZHOU Jian-ping,LI Yao-hui,LIN Lei,LI Wen-xian. Isolation, purification and assessment of rat pancreas islet[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2008, 36(2): 50-54
Authors:ZENG Ming-hua  CHEN Shu-lin  JIANG Tian-yuan  MAO Hai-peng  PU Qiang-hong  ZHOU Jian-ping  LI Yao-hui  LIN Lei  LI Wen-xian
Affiliation:1 College of Veterinary Medicine,Northwest A & F university,Yangling,Shannxi 712100,China;2 Henan Dairy Products Engineering and Technology Research Center,Zhengzhou,Henan 450008,China)
Abstract:
Keywords:rat Islets   isolation and purification    islet counting    secretory activity
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