| 大鼠胰岛的分离、纯化与评价方法改良 |
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| 引用本文： | 曾明华,陈树林,蒋田园.大鼠胰岛的分离、纯化与评价方法改良[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(2):50-54. |
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| 作者姓名： | 曾明华 陈树林 蒋田园 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100
2. 河南省乳品工程技术研究中心,河南,郑州,450008 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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陕西省自然科学基金
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河南省乳品工程技术研究中心科研基金 |
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| 摘 要： | 【目的】简化胰岛的分离纯化方法,建立完善的胰岛评价体系。【方法】采用Ⅴ型胶原酶分离出Spra-gue-Dawley大鼠胰岛,并采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛。纯化的胰岛通过双硫腙(Dithi-zone,DTZ)染色进行计数及纯度检测,丫啶橙(AO)-碘化丙啶(PI)双染色法确定分离细胞的存活率,体外葡萄糖刺激释放胰岛素试验检测胰岛的分泌活性。采用Adobe Photoshop程序改进了常规的胰岛计数方法,并进行胰岛标准计数。【结果】平均每只成年Sprague Dawley大鼠的胰腺,可获得(3 840±24)当量数(IEQ)纯化胰岛,纯度可达到90%,细胞平均存活率达92%。【结论】采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法及基于Adobe Photoshop程序的标准计数方法,可分别用于大鼠胰岛分离纯化和计数。
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| 关 键 词： | 大鼠胰岛 分离纯化 胰岛计数 分泌活性 |
| 文章编号： | 1671-9387（2008）02-0050-05 |
| 收稿时间： | 2007-03-06 |
| 修稿时间： | 2007年3月6日 |
Isolation, purification and assessment of rat pancreas islet |
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| ZENG Ming-hua,CHEN Shu-lin,JIANG Tian-yuan,MAO Hai-peng,PU Qiang-hong,ZHOU Jian-ping,LI Yao-hui,LIN Lei,LI Wen-xian.Isolation, purification and assessment of rat pancreas islet[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(2):50-54. |
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| Authors: | ZENG Ming-hua CHEN Shu-lin JIANG Tian-yuan MAO Hai-peng PU Qiang-hong ZHOU Jian-ping LI Yao-hui LIN Lei LI Wen-xian |
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| Institution: | 1 College of Veterinary Medicine,Northwest A & F university,Yangling,Shannxi 712100,China;2 Henan Dairy Products Engineering and Technology Research Center,Zhengzhou,Henan 450008,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rat Islets isolation and purification islet counting secretory activity |
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