鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备* |
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引用本文: | 萨仁高娃,刘胜旺,孔宪刚,丁忠庆,乌尼. 鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备*[J]. 农业生物技术学报, 2003, 11(4): 412-416 |
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作者姓名: | 萨仁高娃 刘胜旺 孔宪刚 丁忠庆 乌尼 |
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作者单位: | 1. 内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001 3. 东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2001AA249032). |
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摘 要: | 将编码鸡(Gallus gallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Eschetichia coli)原核表达载体pPROEX^HT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IFTG于37℃诱导培养。SDS-PAGE和Western blot分析显示,表达的鸡IL-2融合蛋白分子量约为19kD。融合蛋白经薄层扫描发现目的蛋白表达量约占菌体蛋白的30%。包涵体被6mol/L,盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-2融合蛋白及其纯化产物免疫家兔,制备兔抗鸡IL-2多克隆抗血清,并用琼脂扩散实验对多克隆抗血清进行鉴定,表明其与纯化的重组鸡IL-2蛋白具有良好的反应性,而且该反应是特异的。
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关 键 词: | 鸡白介素-2基因 大肠杆菌 表达 多克隆抗体 |
修稿时间: | 2002-10-07 |
Expression of Recombinant Chicken IL-2 Gene in Escherichia coli and Preparation of Antibody against Recombinant Chicken IL-2 protein |
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Abstract: | |
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