| 猪A组轮状病毒Vp7基因与双标记表达载体pW425et的重组及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 胡静涛,宁军,肖冲,王春凤.猪A组轮状病毒Vp7基因与双标记表达载体pW425et的重组及在大肠杆菌中的表达[J].吉林农业大学学报,2008,30(1):84-88. |
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| 作者姓名： | 胡静涛 宁军 肖冲 王春凤 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学动物科技学院,长春,130118 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划项目(2003AA24112002)，国家自然科学基金项目(30201999、30671573) |
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| 摘 要： | 以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了981 bp的Vp7基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T载体中,构建出克隆质粒pGEM-T-Vp7。以SacⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM-T-Vp7及双标记表达载体pW425et,并将纯化的Vp7基因亚克隆至双标记表达载体pW425et中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425et-Vp7。将pW425et-Vp7转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态Escherichia coliX13中,经生长功能弥补筛选阳性克隆和SDS-PAGE分析,可见约40 kD的融合蛋白。Western blot分析表明该蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性。
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| 关 键 词： | 轮状病毒 Vp7基因 表达载体 大肠杆菌 表达 |
| 文章编号： | 1000-5684(2008)01-0084-05 |
| 修稿时间： | 2007年1月29日 |
Expression of Recombinant Vp7 Gene of Porcine Rotavirus A with Double Labeling Expression Vector pW425et in Escherichia coli |
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| HU Jing-tao,NING Jun,XIAO Chong,WANG Chun-feng.Expression of Recombinant Vp7 Gene of Porcine Rotavirus A with Double Labeling Expression Vector pW425et in Escherichia coli[J].Journal of Jilin Agricultural University,2008,30(1):84-88. |
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| Authors: | HU Jing-tao NING Jun XIAO Chong WANG Chun-feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rotavirus Vp7 gene expression vector E coli expression |
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