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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达
引用本文:邵美丽 刘思国 王春来 郭设平 宫强 佟恒敏. 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达[J]. 中国兽医科技, 2006, 36(1): 25-28
作者姓名:邵美丽 刘思国 王春来 郭设平 宫强 佟恒敏
作者单位:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨150001 [2]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030
摘    要:以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜蛋白(OMP)基因特异片段,并克隆于pMD18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达栽体pGEX-6P-1,成功构建了重组表达载体pGEX-omp;以此转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),经SDS-PAGE鉴定,表达的可溶性融合蛋白分子质量约为61 ku,命名为GST-OMP。以GST亲和层析柱纯化并利用Xa因子酶解,获得切掉标签的OMP。经ELISA检测,该OMP蛋白能够与兔抗APP的阳性血清反应,具有很好的免疫活性。GST-OMP蛋白的成功表达为APP OMP相关分子生物学功能的研制奠定了基础。

关 键 词:猪胸膜肺炎放线杆菌 外膜蛋白基因 克隆 表达
文章编号:1673-4696(2006)01-0025-04
收稿时间:2005-08-18
修稿时间:2005-12-06

Cloning and expression of OMP gene from Actinobacillus pleuropneumoniae
SHAO Mei-li, LIU Si-guo , WANG Chun-lai , GUO She-ping , GONG Qiang , TONG Heng-min. Cloning and expression of OMP gene from Actinobacillus pleuropneumoniae[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2006, 36(1): 25-28
Authors:SHAO Mei-li   LIU Si-guo    WANG Chun-lai    GUO She-ping    GONG Qiang    TONG Heng-min
Abstract:
Keywords:Actinobacillus pleuropneumoniae   OMP gene   cloning   expression
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