|
|||||
|
|
| 甘蓝型油菜丙酮酸激酶基因RNA干扰载体的构建(英文) | |
| 作者单位： | ;1.国家油菜改良中心南京分中心/农业部长江下游棉花与油菜重点实验室/江苏省农业科学院经济作物研究所 |
| 摘 要： | 采用基因芯片技术,从油菜中鉴定了一个油分积累优势表达基因即丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)基因。为构建甘蓝型油菜PK基因的RNA干扰(RNAi)载体,通过设计引物克隆了PK基因长498 bp的siRNA靶序列,连接到pEASY-T1载体上,采用NotI和XhoI酶切,酶切产物连接到本课题组新近改造的RNAi平台载体pHurricane的NotI和XhoI位点,通过多重PCR鉴定证实载体构建成功,然后将上述PK基因反向重复框克隆到加入napin启动子的pCAMBIA1390表达载体相应的酶切位点上,构建具有种子特异性表达的PK基因的RNAi载体。限制性内切酶酶切证实载体构建成功,为进一步研究PK基因参与决定油菜油分积累的分子机理和代谢调控奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 甘蓝型油菜 丙酮酸激酶 RNA干扰 载体构建 |
Construction of a RNA Interference Vector of Brassica napus L.Pyruvate Kinase Gene |
|
| Abstract: | |
| Keywords: | |