| 牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 黄杰,岳丰雄,徐宏军.牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].动物医学进展,2017,38(5). |
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| 作者姓名： | 黄杰 岳丰雄 徐宏军 |
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| 作者单位： | 成都天邦生物制品有限公司,四川成都,610100 |
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| 摘 要： | 为了建立一种快速、特异、灵敏的检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Taq Man实时荧光定量RT-PCR的方法,根据NCBI GenBank上已公布的BVDV、猪瘟病毒(CSFV)核酸序列进行比对,利用Oligo 6.71软件设计一对引物及一条探针,建立了检测BVDV的Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、重复性及其敏感性进行相关试验,结果表明该方法检测出BVDV标准毒株Oregon C_(24)V为阳性,猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和CSFV的检测均为阴性。对BVDV标准毒株最低检测量达到10~(-2.5) TCID_(50)。该方法检测同一样品重复进行8次检测,结果均一致,表明方法的重复性较好。应用该方法对6批猪瘟疫苗专用血清进行BVDV检测,阳性率为16.7%;猪瘟弱毒苗中未检出BVDV。建立的BVDV Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法为生产无BVDV污染的猪瘟苗提供了有力的保障。
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR 猪瘟病毒 疫苗 |
Establishment Real-time Fluorescence Quantitative RT-PCR for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus |
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| HUANG Jie,YUE Feng-xiong,XU Hong-jun.Establishment Real-time Fluorescence Quantitative RT-PCR for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus[J].Progress In Veterinary Medicine,2017,38(5). |
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| Authors: | HUANG Jie YUE Feng-xiong XU Hong-jun |
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