| 大麻基因组DNA提取及AFLP体系的建立 |
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| 引用本文： | 陈璇,胡尊红,郭鸿彦,张庆滢,许艳萍,郭孟璧,杨明.大麻基因组DNA提取及AFLP体系的建立[J].分子植物育种,2010,8(3):619-625. |
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| 作者姓名： | 陈璇 胡尊红 郭鸿彦 张庆滢 许艳萍 郭孟璧 杨明 |
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| 作者单位： | 1. 云南农业科学院经济作物研究所,昆明,650205
2. 云南农业科学院经济作物研究所,昆明,650205;云南农业大学农学与生物技术学院,昆明,650201 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项，国家麻类产业技术体系 |
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| 摘 要： | 本研究以大麻嫩叶为材料,以改进的SDS法,提取了高质量的大麻基因组DNA,经过酶切、连接、预扩增、选择性扩增、银染等试验条件的优化,建立了AFLP反应体系。研究结果表明:在常规的SDS提取液里加入8μL/mLβ-巯基乙醇(V/V)和3%PVP(M/V)能够提取到高质量的适用于AFLP的基因组DNA;选取150ng大麻基因组DNA来进行酶切,EcoRⅠ和MseⅠ各0.5U,在37℃酶切4h,即可完全酶切。最优的选择性扩增体系为20μL反应体系中含有1.0U Taq DNA polymerase、1.0μL25mmol/L Mg2+、0.4μL10mmol/LdNTPs、50ng/μL引物各1.0μL、4.0μL稀释50倍的预扩增产物及2μL10×PCR Buffer;使用该方法,获得了清晰、稳定的图谱并筛选到了18对多态性较好的AFLP引物组合。
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| 关 键 词： | 抗大麻 DNA提取 优化 |
Extraction of DNA and Construction of AFLP Reaction System in Hemp |
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| Chen Xuan,Hu Zunhong,Guo Hongyan,Zhang Qingying,Xu Yanping,Guo Mengbi,Yang Ming.Extraction of DNA and Construction of AFLP Reaction System in Hemp[J].Molecular Plant Breeding,2010,8(3):619-625. |
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| Authors: | Chen Xuan Hu Zunhong Guo Hongyan Zhang Qingying Xu Yanping Guo Mengbi Yang Ming |
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| Keywords: | AFLP |
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