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罗非鱼肠蛋白酶的分离纯化及其性质
引用本文:吴燕燕,李来好,郝志明,杨贤庆.罗非鱼肠蛋白酶的分离纯化及其性质[J].水产学报,2010,34(3):357-366.
作者姓名:吴燕燕  李来好  郝志明  杨贤庆
作者单位:1. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300
2. 国家加工食品质量监督检测中心,广东,广州,510330
基金项目:农业部“九四八”项目(2006-G40); 中央级公益性专项资金项目(2007ZD05); 广东省重点项目(2005B33201002)
摘    要:以罗非鱼肠为原料,采用超声波辅助提取技术、电泳技术和层析技术等对罗非鱼肠道蛋白酶进行研究,结果表明:将鱼肠匀浆经超声波提取的粗酶液,用30%~70%的硫酸铵盐进行盐析、HitrapTM Q FF阴离子交换柱纯化及Sephadex G-100凝胶柱分离纯化,得到罗非鱼肠蛋白酶纯品,其比活为335U/mg,得率为32.8%;SDS-PAGE电泳为单一蛋白酶带,分子量为28ku。该酶最适pH为8.0~8.5,在pH7.0~9.0的条件下稳定;最适温度为37~42℃,热稳定性好;该酶的Km值和Vmax值分别为0.605g/L和9.407μg/min。金属离子Ag+、Pb2+对蛋白酶有完全抑制作用,Na+、K+对该酶无抑制作用。丝氨酸蛋白酶抑制剂能完全抑制该酶活性,胃蛋白酶抑制剂和脲素对该酶有一定抑制作用,EDTA没有明显抑制作用,DTT能激活该酶活性,该酶为丝氨酸蛋白酶。

关 键 词:罗非鱼肠  蛋白酶  纯化  性质  
收稿时间:2009/10/9 0:00:00
修稿时间:2009/12/1 0:00:00

Purification and characterization of protease from intestine of tilapia
LI Laihao,HAO Zhiming and YANG Xianqing.Purification and characterization of protease from intestine of tilapia[J].Journal of Fisheries of China,2010,34(3):357-366.
Authors:LI Laihao  HAO Zhiming and YANG Xianqing
Institution:WU Yan-yan 1,LI Lai-hao1,HAO Zhi-ming2,YANG Xian-qing1 (1.South China Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Guangzhou 510300,China,2.National Centre for Quality Supervision , Test of Processed Food,Guangzhou 510330,China)
Abstract:Tilapia intestines as enzyme raw materials are studied systematically by ultrasonic extraction technology of auxiliary,electrophoresis,chromatography techniques and so on for the first time. The results showed that: after organic mashing and ultrasound-assisted extracting,30%-70% of ammonium sulfate fractions,QFF anion chromatography and Sephedax G-100 gel chromatography,the purified protease from tilapia intestines was obtained. The purified protease specific activity is 335 U/mg and yield is 32.8%. The re...
Keywords:tilapia intestine  protease  purification  characterization  
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