铜绿假单胞菌oprH基因DNA疫苗的构建与检测

研究旨在构建铜绿假单胞菌oprH基因的DNA疫苗。试验根据GenBank中已发表的铜绿假单胞菌的oprH基因序列，设计合成了一对特异性引物，利用PCR技术由铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增获得该目的基因，进行胶回收纯化并与T载体进行连接，经双酶切和PCR鉴定后将重组质粒进行酶切回收目的基因片段，并将其亚克隆于真核表达载体pCAGGS-HA中，以双酶切和PCR方法进行鉴定。结果显示：PCR成功扩增出约600 bp的oprH基因，连接T载体后的重组质粒经双酶切和PCR鉴定，均可获得大小正确的目的基因片段。真核重组载体鉴定结果显示，oprH基因成功克隆于真核表达载体pCAGGS-HA中。研究表明，试验成功构建了oprH基因的DNA疫苗，为进一步研究其免疫效果及铜绿假单胞菌新型疫苗的研制提供参考。