高致病性血清4型禽腺病毒hexon基因在昆虫细胞中的表达及鉴定 |
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引用本文: | 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波.高致病性血清4型禽腺病毒hexon基因在昆虫细胞中的表达及鉴定[J].江苏农业学报,2018(4). |
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作者姓名: | 梅梅 陆吉虎 张雪花 唐应华 侯继波 |
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作者单位: | 江苏省农业科学院动物免疫工程研究所;江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 |
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摘 要: | 为获得杆状病毒表达的重组高致病性血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAd V-4)六邻体蛋白(Hexon),本研究通过PCR从高致病性血清4型禽腺病毒基因组中扩增到hexon基因,克隆到杆状病毒转移载体p Fast Bac-1,获得重组转移质粒p Fast Bac-hexon,将其转化DH10Bac大肠杆菌并筛选,获得重组杆状病毒穿梭质粒r Bacmid-hexon,将重组杆状病毒穿梭质粒转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒r BV-hexon。间接免疫荧光试验和免疫印迹试验结果显示,Sf9细胞中的Hexon蛋白能够与血清4型禽腺病毒阳性血清发生特异性反应,蛋白质分子量约110 000,表明Hexon蛋白在Sf9细胞中获得良好的表达。
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