棉铃虫蛋白酶体β5基因Habeta5的克隆与序列分析

目的]运用分子生物学技术克隆棉铃虫蛋白酶体B5亚基新基因，为进一步研究其功能奠定基础。方法]以棉铃虫中肠总RNA为模扳，利用快速扩增cDNA末端（RACE）技术克隆棉铃虫蛋白酶体B5亚基新基因的cDNA序列并对所获序列进行分析。结果]成功克隆了棉铃虫蛋白酶体瞄亚基全长947bp的cDNA序列，命名为Habeta5，包含1个843bp的完整开放读码框（ORF）序列，编码蛋白质为280个氨基酸残基，预测分子量为30．87kD，等电点为6．53。Habeta5蛋白在74～261氨基酸残基位置为蛋白酶体B5亚基的保守区域。Clustal W进行多序列比对发现，Habeta5蛋白质与果蝇等昆虫蛋白酶体B5具有62％以上的同源性，蛋白酶体B5的保守区域高度一致。邻近法NJ分子进化分析也显示，Habeta5蛋白质与其他生物蛋白酶体茚进化上同源。结论]序列分析比对的结果表明所克隆的基因为棉铃虫蛋白酶体B5亚基基因（GenBank登陆号：FJ358434）。