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不同化学类型樟树叶片总RNA提取方法比较
引用本文:伍艳芳,徐海宁,江香梅,温强,熊振宇.不同化学类型樟树叶片总RNA提取方法比较[J].林业科技开发,2013,27(4):75-79.
作者姓名:伍艳芳  徐海宁  江香梅  温强  熊振宇
作者单位:江西省林业科学院,江西省植物生物技术重点实验室,南昌330032
基金项目:江西省科技支撑项目,江西省科技支撑项目
摘    要:采用SDS/酸酚法、Trizol试剂法、常规CTAB法及改良的CTAB法,分别提取5种化学类型樟树叶片总RNA,并对提取效果进行了比较分析。结果表明:Trizol法难以提取樟树叶片总RNA,得率很低;SDS/酸酚法和常规CTAB法得到的RNA存在DNA污染,富含蛋白、多糖、多酚等杂质;这3种方法均不适于富含多糖多酚类物质的樟树叶片总RNA的提取。改良的CTAB法能够提取得到樟树5种化学类型叶片总RNA,且在操作过程中,异樟比油樟和脑樟更易提取。此法能有效去除多糖和蛋白,提取得到的RNA 28S和18S rRNA条带清晰,OD260/OD280值为2.0左右,平均产率分别为115.8μg/g FW。经RT-PCR检测,所得总RNA质量高、完整性好、成功率高,可以满足下一步实验的要求,可作为樟树叶片总RNA提取的首选方法。

关 键 词:樟树  化学类型  RNA提取  CTAB法  RT-PCR

Comparative research on extraction methods for total RNA from leaves of five chemotypys of Cinnamomum camphora
WU Yan-fang , XU Hai-ning , JIANG Xiang-mei , WEN Qiang , XIONG Zhen-yu.Comparative research on extraction methods for total RNA from leaves of five chemotypys of Cinnamomum camphora[J].China Forestry Science and Technology,2013,27(4):75-79.
Authors:WU Yan-fang  XU Hai-ning  JIANG Xiang-mei  WEN Qiang  XIONG Zhen-yu
Institution:Jiangxi Academy of Forestry,Jiangxi Provincial Bio-tech Key Lab. for Plant,Nanchang 330032,China
Abstract:
Keywords:Cinnamomum camphora  chemotypys  RNA extraction  improved CTAB method  RT-PCR
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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