| 全缘叶绿绒蒿ISSR体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 赵琬玥,冷秋思,熊健,区智,屈燕.全缘叶绿绒蒿ISSR体系的建立与优化[J].北方园艺,2018(13):80-86. |
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| 作者姓名： | 赵琬玥 冷秋思 熊健 区智 屈燕 |
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| 作者单位： | 西南林业大学园林学院,云南昆明,650224 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31460218)，云南省高校重点建设学科(风景园林学)建设资助项目(云学位[2011]16号)，国家级质量工程园林专业综合改革试点资助项目(50126002) |
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| 摘 要： | 以全缘叶绿绒蒿的DNA为模板,利用正交实验设计,研究了Mg~(2+)、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、DNA这5种PCR反应成分对反应体系的影响,以期建立并优化一个适合全缘叶绿绒蒿的ISSR反应体系,并用优化的体系对UBC公布的100条ISSR引物进行筛选。结果表明:在50μL优化后的反应体系中,含3 mmol·L~(-1) Mg~(2+)、2mmol·L~(-1)dNTPs、0.4mmol·L~(-1)引物、1.25UTaq DNA聚合酶、60ng DNA。通过梯度PCR仪检验,确定了适宜的退火温度、延伸时间和循环次数。利用该体系共筛选出16条ISSR引物,并对全缘叶绿绒蒿共10株个体材料进行扩增检验,获得了较好的扩增效果。利用该体系,可为今后ISSR标记在绿绒蒿属植物的种质鉴定和遗传多样性分析等方面的应用提供一定的试验基础。
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| 关 键 词： | 全缘叶绿绒蒿 ISSR 正交设计 体系建立优化 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Meconopsis integri folia |
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| ZHAO Wanyue,LENG Qiusi,XIONG Jian,OU Zhi,QU YaN.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Meconopsis integri folia[J].Northern Horticulture,2018(13):80-86. |
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| Authors: | ZHAO Wanyue LENG Qiusi XIONG Jian OU Zhi QU YaN |
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