| 牛分枝杆菌Ag85B基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 姜秀云,王春凤,王春芳,何昭阳.牛分枝杆菌Ag85B基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].中国兽医学报,2006,26(1):51-54. |
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| 作者姓名： | 姜秀云 王春凤 王春芳 何昭阳 |
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| 作者单位： | 1. 吉林农业大学,生物技术学院,吉林,长春,130118
2. 吉林农业大学,动物科技学院,吉林,长春,130118 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;国家科技攻关项目;吉林农业大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板．根据已发表的Ag85B成熟蛋白基因的核苷酸序列设计合成特异性引物进行PCR扩增．获得约860bp的DNA片段。通过T-A克隆技术．将PCR产物克隆至pGEM-T载体中．成功地构建出克隆载体pGEM-T-85B。以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切pGEM-T-85B和pET28a（＋）．并将纯化的Ag85B基因亚克隆至pET28a（＋）中，构建出原核表达载体pET28a-85B。将pET28a-85B转化至感受态E.coli BL21（DE3）中．经IPTG诱导和SDS-PAGE分析．可见约30000的外源蛋白带。Western blot分析发现，该蛋白具有牛分枝杆菌抗原性．从而为进一步研究Ag85B的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 Ag85B基因 克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1005-4545(2006)01-0051-03 |
| 收稿时间： | 2004-06-15 |
| 修稿时间： | 2004年6月15日 |
Cloning and Expression of Mycobacterium bovine Secreted Protein Ag85B in E. coli |
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| JIANG Xiu-yun,WANG Chun-feng,WANG Chun-fang,HE Zhao-yang.Cloning and Expression of Mycobacterium bovine Secreted Protein Ag85B in E. coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2006,26(1):51-54. |
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| Authors: | JIANG Xiu-yun WANG Chun-feng WANG Chun-fang HE Zhao-yang |
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| Institution: | 1. College of Biotechnology ,Jilin Agricultural University , Changchun 130118, China ; 2. College of Animal Science ,lilin Agricultural University, Changchun 130118,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium bovine Ag85B gene tcloning prokaryotic expression |
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