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茄科雷尔氏菌IMSA-LAMP检测方法的建立
引用本文:袁婷,罗龙辉,张雪吟,刘吉平. 茄科雷尔氏菌IMSA-LAMP检测方法的建立[J]. 华南农业大学学报, 2022, 43(4): 89-98
作者姓名:袁婷  罗龙辉  张雪吟  刘吉平
作者单位:华南农业大学 动物科学学院/亚太地区蚕桑培训中心, 广东 广州 510642
基金项目:财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系
摘    要:【目的】桑树青枯病是由茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的一种危害严重的细菌性病害,建立一种快速、灵敏的茄科雷尔氏菌检测方法,对桑树青枯病的有效控制有重要意义。【方法】本研究以茄科雷尔氏菌果胶裂解酶基因(Pectate lyase gene)为靶标,基于等温多自配引发扩增技术(Isothermal multiple self-matching-initiated amplification,IMSA)的引物设计原理,结合环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的反应体系,建立一种快速有效检测茄科雷尔氏菌的IMSA-LAMP法,并对该方法的最佳反应参数进行了筛选。【结果】基于果胶裂解酶基因建立的IMSA-LAMP检测方法在64.5℃条件下,45 min内可完成对阳性样品的特异检测,对茄科雷尔氏菌的模板DNA检测灵敏度达200 fg/μL (对应菌为1×102CFU/mL);对生产上收集的疑似桑树青枯病病样的检出率为87.5%。【结论】IMSA-LAMP检测方法具有良好的实用...

关 键 词:桑树青枯病  IMSA-LAMP  茄科雷尔氏菌  果胶裂解酶基因
收稿时间:2022-03-09

Establishment of IMSA-LAMP detection method for Ralstonia solanacearu
YUAN Ting,LUO Longhui,ZHANG Xueyin,LIU Jiping. Establishment of IMSA-LAMP detection method for Ralstonia solanacearu[J]. JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY, 2022, 43(4): 89-98
Authors:YUAN Ting  LUO Longhui  ZHANG Xueyin  LIU Jiping
Affiliation:College of Animal Science, South China Agricultural University/Regional Sericulture Training Center For Asia-Pacific, Guangzhou 510642, China
Abstract:
Keywords:Mulberry bacterial wilt  IMSA-LAMP  Ralstonia solanacearum  Pectate lyase gene
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