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奶牛瘤胃上皮细胞分离培养与鉴定
引用本文:姜茂成,詹康,严康,赵倩明,赵国琦.奶牛瘤胃上皮细胞分离培养与鉴定[J].中国农业大学学报,2018,23(1):80-86.
作者姓名:姜茂成  詹康  严康  赵倩明  赵国琦
作者单位:扬州大学动物科学与技术学院;江苏省畜牧总站;
基金项目:现代农业奶牛产业技术体系专项资金资助(CARS-36);国家自然科学基金项目(31572430);江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SJCX17_0630);农业三新工程(SXGC[2016]326)
摘    要:在体外分离培养奶牛瘤胃上皮细胞,可为奶牛瘤胃生理功能和吸收机制研究和永生化奶牛瘤胃上皮细胞奠定基础。通过胰蛋白酶消化法从奶牛瘤胃组织中分离出瘤胃上皮细胞,并通过免疫细胞化学的方法检测细胞角蛋白,CCK-8检测细胞生长曲线,β-半乳糖苷酶染色鉴定细胞的衰老以及细胞染色体核型分析来鉴定瘤胃上皮细胞。结果表明:1)利用胰蛋白酶消化法可以稳定的培养出瘤胃上皮细胞并且能够在体外传代大约5代;2)通过在显微镜下进行细胞形态的观察呈单层"岛屿状";3)在荧光显微镜下细胞角蛋白抗原能够发出绿色荧光;4)奶牛瘤胃上皮细胞传至第5代,β-半乳糖苷酶被染成蓝色,同时,细胞出现衰老和停滞生长;5)染色体核型分析表明奶牛瘤胃上皮细胞的染色体数为60条。研究发现通过酶消化奶牛瘤胃组织能够获得奶牛瘤胃上皮细胞,但只能传至5代。

关 键 词:奶牛瘤胃上皮细胞  永生化  细胞角蛋白18  染色体核型

Culture and identification of the bovine rumen epithelial cell line
JIANG Maocheng,ZHAN Kang,YAN Kang,ZHAO Qianming and ZHAO Guoqi.Culture and identification of the bovine rumen epithelial cell line[J].Journal of China Agricultural University,2018,23(1):80-86.
Authors:JIANG Maocheng  ZHAN Kang  YAN Kang  ZHAO Qianming and ZHAO Guoqi
Institution:College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China,College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China,College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Provincial Station of Animal Husbandry, Nanjing 210000, China,College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China and College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China
Abstract:
Keywords:bovine rumen epithelial cells  immortalize  cytokeratin 18  karyotype
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