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叶用莴苣LsHsp70-3701基因过表达载体的构建及遗传转化体系的优化
引用本文:苏振琪,韩莹琰,李雅博,刘然,刘超杰,郝敬虹,范双喜.叶用莴苣LsHsp70-3701基因过表达载体的构建及遗传转化体系的优化[J].中国农业大学学报,2018,23(1):63-70.
作者姓名:苏振琪  韩莹琰  李雅博  刘然  刘超杰  郝敬虹  范双喜
作者单位:北京农学院植物科学技术学院;
基金项目:国家自然科学基金项目(31372057,31401883);北京市叶类蔬菜创新团队建设专项(blvt-02);北京市农业科技项目(20140134);北京市科技成果转化提升计划项目(PXM2015-D14207O00012);北京市自然科学基金B类项目
摘    要:为研究叶用莴苣中Hsp70基因的功能,以提高其耐热性,构建LsHsp70-3701过表达载体,农杆菌介导法转化叶用莴苣。从叶用莴苣中克隆得到LsHsp70-3701,利用NcoⅠ和SpeⅠ双酶切LsHsp70-3701和植物表达载体pCAMBIA1304,回收目的片段并连接,经鉴定后获得过表达载体。以‘P-S11'叶用莴苣为转化材料,针对遗传转化关键因素:苗龄、植物激素浓度、预培养时间、侵染液OD值、侵染时间和共培养时间进行优化。试验结果表明最佳转化条件为:苗龄5d的子叶,6-BA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L,KT质量浓度为0.2mg/L,OD600为0.3,预培养2d,侵染10min,共培养2d。

关 键 词:莴苣  过表达载体  农杆菌  遗传转化
收稿时间:2017/3/6 0:00:00

Over-expression vecter construction and Agrobacterium transformation optimization of leaf lettuce gene LsHsp70-3701
SU Zhenqi,HAN Yingyan,LI Yabo,LIU Ran,LIU Chaojie,HAO Jinghong and FAN Shuangxi.Over-expression vecter construction and Agrobacterium transformation optimization of leaf lettuce gene LsHsp70-3701[J].Journal of China Agricultural University,2018,23(1):63-70.
Authors:SU Zhenqi  HAN Yingyan  LI Yabo  LIU Ran  LIU Chaojie  HAO Jinghong and FAN Shuangxi
Institution:College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China,College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China,College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China,College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China,College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China,College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China and College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China
Abstract:
Keywords:lettuce  over-expression vector  Agrobacterium  genetic transformation
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