棉花GhSKIP35基因的克隆与表达分析 |
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引用本文: | 刘凯,张华崇,齐放军,张文蔚,简桂良.棉花GhSKIP35基因的克隆与表达分析[J].棉花学报,2015,27(2):111-117. |
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作者姓名: | 刘凯 张华崇 齐放军 张文蔚 简桂良 |
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作者单位: | 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193 |
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基金项目: | 公益性行业(农业)科研专项(201503109) |
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摘 要: | 以中植棉KV1 SSH文库为基础,从陆地棉中植棉KV1中克隆出来泛素途径SKIP35基因,命名为GhSKIP35。该基因的开放阅读框全长为1863个核苷酸,编码620个氨基酸,含有1个ANK保守结构域。进化分析表明,Gh SKIP35蛋白与甜橙(Citrus sinensis)的SKIP35蛋白相似性最高。q RT-PCR分析显示:在接种大丽轮枝菌V991菌系后初期Gh SKIP35基因表达量激增,12 h便可达到顶峰,24~48 h逐渐下降,推测它在陆地棉抗黄萎病早期防卫反应中起重要作用。利用VIGS(Virus induced gene silencing)技术,在中植棉KV1中成功地沉默Gh SKIP35基因;对沉默棉株接种大丽轮枝菌V991鉴定显示,其病情指数为50.75,而野生型的中植棉KV1和转化空载体棉株的病情指数分别为9.38和11.54。Gh SKIP35基因沉默后,中植棉KV1对黄萎病的抗性丧失,表明Gh SKIP35基因在陆地棉抗黄萎病的过程中起重要作用。
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关 键 词: | 棉花 大丽轮枝菌 SKIP35 q RT-PCR VIGS |
收稿时间: | 2014-09-15; |
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