| 根癌农杆菌介导的芪合酶基因转化烟草遗传体系的优化 |
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| 引用本文： | 安 娜,陈耀锋,崔志刚.根癌农杆菌介导的芪合酶基因转化烟草遗传体系的优化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(5):61-67. |
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| 作者姓名： | 安 娜 陈耀锋 崔志刚 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学农学院;杨凌职业技术学院生物工程系; |
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| 基金项目： | 陕西省“13115”科技重大专项(2008ZDKG-07) |
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| 摘 要： | 【目的】研究根癌农杆菌介导的芪合酶基因转化烟草遗传体系的优化条件。【方法】以"中烟99"叶片为受体,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,GV3101)介导法,将芪合酶基因导入烟草基因组,并对其遗传体系进行了优化,对筛选获得的转基因烟草植株进行检测。【结果】根癌农杆菌介导的芪合酶基因遗传转化的最佳条件为:将预培养2 d的烟草外植体,用稀释10倍的GV3101菌株菌液(OD600=0.6)浸染8 min后,共培养3 d,然后转入含卡那霉素(Km)50 mg/L和羧苄青霉素(Cb)500 mg/L的筛选分化培养基上诱导分化,待抗性芽长到2~3 cm后,转入含Km 50 mg/L和Cb 500 mg/L的筛选生根培养基上进行筛选,在以上最佳遗传转化条件下,初步筛选到54株转化体,经PCR和RT-PCR检测获得25株转化烟草植株。【结论】经卡那霉素筛选、PCR、RT-PCR检测后,初步证明芪合酶基因已被整合到烟草基因组中,并可以正常转录。
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| 关 键 词： | 芪合酶基因 烟草 根癌农杆菌 遗传转化 |
| 收稿时间： | 2009/11/23 0:00:00 |
Study on the optimization of transferring stilbene synthase gene into tobacco mediated by Agrobacterium tumefaciens |
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| AN Na,CHEN Yao-feng,CUI Zhi-gang,BAI Yan-hong.Study on the optimization of transferring stilbene synthase gene into tobacco mediated by Agrobacterium tumefaciens[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(5):61-67. |
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| Authors: | AN Na CHEN Yao-feng CUI Zhi-gang BAI Yan-hong |
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| Institution: | AN Na1,CHEN Yao-feng1,CUI Zhi-gang1,BAI Yan-hong2(1 College of Agronomy,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China,2 Department of Biotechnology,Yangling Vocational , Technical College,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | stilbene synthase gene tobacco Agrobacterium tumefaciens genetic transformation |
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