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抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化
引用本文:乔亚红,田桂英,郑银英,等.抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(1):102-110.
作者姓名:乔亚红  田桂英  郑银英  
作者单位:石河子大学 农学院 农业生物技术重点实验室;石河子大学 农学院 农业生物技术重点实验室;石河子大学 农学院 农业生物技术重点实验室
基金项目:国际科技合作与交流专项(20072072);国家自然科学基金项目(31260420)
摘    要:【目的】利用农杆菌介导法将抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12转入红番3号加工番茄,获得抗CMV和ToMV的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增,选取新疆加工番茄CMV分离物NS0-4 1a复制酶第1 051-1 350bp序列和ToMV分离物SCS-2 130/180ku复制酶第1 920-2 200bp序列,作为干扰片段CR12和To12。通过T克隆载体将CR12和To12连接成拼接片段TC12,构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC12。通过农杆菌介导法,用其转化红番3号加工番茄,经过筛选、PCR检测得到转基因植株。【结果】成功构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,并用其转化番茄植株,从转化的1 500个愈伤组织中获得33株再生植株,利用PCR对再生植株进行检测,显示从33株再生植株中获得了19株转基因植株,转化率为1.26%。【结论】构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,用其转化红番3号加工番茄,获得了转基因植株。

关 键 词:CMV  ToMV  RNAi载体  加工番茄  遗传转化
收稿时间:2013/1/25 0:00:00

Construction of RNAi vector with resistance to Cucumber mosaic virus and Tomato mosaic virus and genetic transformation of processing tomato
QIAO Ya-hong,TIAN Gui-ying and ZHENG Yin-ying,et al.Construction of RNAi vector with resistance to Cucumber mosaic virus and Tomato mosaic virus and genetic transformation of processing tomato[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(1):102-110.
Authors:QIAO Ya-hong  TIAN Gui-ying and ZHENG Yin-ying  
Abstract:
Keywords:Cucumber mosaic virus  Tomato mosaic virus  RNAi vector  processing tomato  genetic transformation
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