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乙型脑炎病毒SA1444-2株E蛋白C端片段的克隆及原核表达
引用本文:李春利,王云龙,李晨阳,李玉林,田璐,赵瑞红,李玲玲.乙型脑炎病毒SA1444-2株E蛋白C端片段的克隆及原核表达[J].安徽农业科学,2008,36(23).
作者姓名:李春利  王云龙  李晨阳  李玉林  田璐  赵瑞红  李玲玲
作者单位:河南师范大学生命科学学院,河南新乡,453007;河南省生物工程技术研究中心,河南郑州,450002;河南省生物工程技术研究中心,河南郑州,450002;郑州职业技术学院,河南郑州,450121;郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州,450002;郑州职业技术学院,河南郑州,450121;河南省生物工程技术研究中心,河南郑州,450002
摘    要:目的]为进一步研制检测乙脑抗体试剂盒奠定了基础.方法]以本实验室已构建的重组质粒pET-E(E为乙脑疫苗株SA14-14-2株E蛋白)为模板,利用PCR扩增乙型脑炎病毒E蛋白基因3'端部分片段,克隆入原核表达栽体pET-32a( ),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳分析表达产物.结果]所表达的融合蛋白分子量约为38KD,表达产物以水溶形式存在,37℃,诱导4 h的诱导培养条件最佳,表达量约占菌体总蛋白的20%.表达产物经Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白.ELISA检测表明,表达的蛋白能与猪乙脑病毒抗体血清发生特异性反应,具有很好的抗原性.结论]基因工程表达的JEV E蛋白有望成为重要的实验室诊断抗原.

关 键 词:乙型脑炎病毒  E蛋白  克隆  表达  Ni-NTA亲和层析

Clone of C-terminal Fragment of SA14-14-2 Strain of Japanese Encephalitis Virus E Protein and its Expression in Escherichia coli
LI Chun-li et al.Clone of C-terminal Fragment of SA14-14-2 Strain of Japanese Encephalitis Virus E Protein and its Expression in Escherichia coli[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2008,36(23).
Authors:LI Chun-li
Abstract:
Keywords:Japanese encephalitis virus  E protein  Clone  Expression  Ni affinity purification
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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