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斑点叉尾鮰呼肠孤病毒CCRV诱导CCK细胞凋亡的研究
引用本文:王瑶,曾令兵,徐进,周勇,肖艺. 斑点叉尾鮰呼肠孤病毒CCRV诱导CCK细胞凋亡的研究[J]. 水产学报, 2013, 37(1): 117-124
作者姓名:王瑶  曾令兵  徐进  周勇  肖艺
作者单位:1. 华中农业大学水产学院,湖北武汉,430070
2. 中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北武汉,430223
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(200803013)
摘    要:为研究斑点叉尾(鱼回)呼肠孤病毒(CCRV)诱导斑点叉尾(鱼回)肾脏细胞(CCK)发生凋亡的机理,以CCRV感染的CCK细胞为实验材料,采用Hoechst 33258染色、DNA片段化检测、TUNEL反应、亚G1期细胞检测以及线粒体膜电位变化检测等方法进行实验.感染试验结果显示,病毒感染斑点叉尾(鱼回)肾脏组织细胞后,细胞变圆、皱缩,随后细胞脱落,细胞单层呈网状,感染72 h后出现典型细胞病变效应(CPE);病毒感染48 h后Hoechst 33258染色结果显示,细胞的染色质固缩、核边缘化或破裂,可观察到凋亡小体,细胞凋亡率随时间增加;DNA片段化检测结果显示,病毒感染细胞12 h后细胞基因组DNA出现片段化,随后逐渐增强,72 h达到最高;TUNEL反应结果表明,病毒感染细胞72 h后细胞基因组DNA断裂,有大量游离3’末端自由羟基(-OH)存在.亚G1期细胞检测结果显示,病毒感染48 h后,约53.44%细胞处于亚G1期;利用JC-1检测试剂盒检测病毒感染细胞的线粒体膜电位变化,病毒感染细胞24 h后线粒体膜通透性发生改变,膜电位变化显著.紫外线灭活与热灭活的斑点叉尾(鱼回)呼肠孤病毒不能诱导斑点叉尾(鱼回)肾脏细胞发生凋亡,表明细胞凋亡依赖于病毒复制.

关 键 词:斑点叉尾(鱼回)  呼肠孤病毒  肾脏组织细胞系  细胞凋亡
收稿时间:2012-08-14
修稿时间:2012-10-04

Studies on the apoptosis of channel catfish(Ictalurus punetaus)kidney cells induced by channel catfish reovirus
WANG Yao,ZENG Lingbing,XU Jin,ZHOU Yong and XIAO Yi. Studies on the apoptosis of channel catfish(Ictalurus punetaus)kidney cells induced by channel catfish reovirus[J]. Journal of Fisheries of China, 2013, 37(1): 117-124
Authors:WANG Yao  ZENG Lingbing  XU Jin  ZHOU Yong  XIAO Yi
Affiliation:1.College of Fisheries,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China; 2.Yangtze River Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Wuhan 430223,China)
Abstract:
Keywords:Ictalurus punctatus   reovirus   kidney cell line   apoptosis
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