| 棉花EPSPS基因一个可变剪接体的克隆及功能分析 |
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| 引用本文： | 巩元勇,倪万潮,郭书巧,束红梅,帕尔哈提·买买提,何林池.棉花EPSPS基因一个可变剪接体的克隆及功能分析[J].棉花学报,2016,28(1):17-26. |
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| 作者姓名： | 巩元勇 倪万潮 郭书巧 束红梅 帕尔哈提·买买提 何林池 |
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| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花和油菜重点实验室,江苏南京,210014;2. 国家棉花工程技术研究中心,新疆乌鲁木齐,830091;3. 江苏沿江地区农业科学研究所,江苏如皋,226541 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31301682)，江苏省农业科技自主创新基金(CX(14)5009)，国家转基因重大专项(2013ZX08005)，国家科技支撑计划课题(2014BAD11B02) |
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| 摘 要： | 可变剪接是生物体基因在转录过程中存在的普遍现象,该现象是导致蛋白质功能多样性的重要原因之一,但是在棉花中关于功能基因可变剪接事件的报到相对较少。本文在克隆棉花EPSPS(5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase)基因的过程中,发现了该基因的一条可变剪接序列。运用生物信息学的方法研究发现,该序列比正常的EPSPS基因的c DNA序列少152 bp,这造成了终止密码子在该序列的提前出现;正常的EPSPS基因内含子的剪切都遵循常见的"GT-AG"剪切规律,而该可变剪接序列最后一个内含子的剪切是按照"AT-AC"规则进行;该可变剪接序列预测的三维结构模型同正常的EPSPS基因的三维结构存在显著差异。将该可变剪接序列插入到原核表达载体p ET32a,随后将构建好的原核表达重组载体转化入大肠杆菌菌株BL21(DE3)Δaro A,通过在M9基本培养基中的生长研究发现该可变剪接序列不具备正常EPSPS基因所具有的功能。本研究结果丰富了棉花EPSPS基因转录本存在的形式,为深入研究棉花EPSPS基因的转录机制打下了基础。
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| 关 键 词： | 可变剪接 棉花 EPSPS基因 原核表达 |
Cloning and Functional Analysis of an Alternative Splicing Sequence of Cotton EPSPS Gene |
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| Gong Yuanyong,Ni Wanchao,Guo Shuqiao,Shu Hongmei,Paerhatio Maimaiti,He Linchi.Cloning and Functional Analysis of an Alternative Splicing Sequence of Cotton EPSPS Gene[J].Cotton Science,2016,28(1):17-26. |
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| Authors: | Gong Yuanyong Ni Wanchao Guo Shuqiao Shu Hongmei Paerhatio Maimaiti He Linchi |
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| Institution: | 1. Institute of Industrial Crops, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Cotton and Rapeseed, Ministry of Agriculture, Nanjing, Jiangsu 210014, China; 2. Research Center of National Cotton Engineering and Technology, Urumqi 830091, China; 3. Institute of Agricultural Sciences of Jiangsu Changjiang River Bank District, Rugao, Jiangsu 226541, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | alternative splicing cotton EPSPS prokaryotic expression |
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