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甘蓝自交不亲和性相关基因BoGSTL21的克隆与表达分析
作者姓名:左同鸿  张贺翠  刘倩莹  廉小平  谢琴琴  胡燈科  张以忠  王玉奎  白晓璟  朱利泉
作者单位:1. 西南大学农学与生物科技学院;2. 西南大学园艺园林学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31572127);;中央高校基本科研业务费(XDJK2017C032)资助~~;
摘    要:谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferases, GSTs)对植物抵御逆境胁迫、解除细胞毒素和植物生长发育起着重要作用。本研究通过甘蓝自花授粉0~60 min的柱头转录组数据分析,筛选到1个受自花授粉诱导上调表达的谷胱甘肽-S-转移酶基因BoGSTL21。BoGSTL21基因开放阅读框长度为900 bp,编码299个氨基酸,理论等电点为8.49,不包含信号肽和跨膜区,含有GST-N和GST-C结构域。BoGSTL21基因启动子中含有光响应、生长素应答、脱落酸反应、低温和干旱响应等多种顺式作用元件。BoGSTL21基因在甘蓝不同组织中均有表达,柱头中的表达量随发育时间而变化,在成熟的柱头中高表达。荧光定量PCR结果证实,BoGSTL21基因在0~60min的表达量变化趋势与转录组分析结果一致。通过酵母双杂交发现,BoGSTL21蛋白与花粉发育相关蛋白BoFAB1C、生长素相关的蛋白BoPATL2、醛缩酶型TIM桶家族蛋白BoF9N129存在相互作用。BoGSTL21基因在大肠杆菌中被成功诱导表达,纯化蛋白大小为34kD,与预测结果一致。表...

关 键 词:甘蓝  基因克隆  自交不亲和  表达分析  酵母双杂交
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