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紫外分光光度法测定啤酒大麦籽粒脂氧合酶活力的研究
引用本文:林立昊,惠宏杉,齐军仓,廖乐,程海涛,王超龙,郭亚南. 紫外分光光度法测定啤酒大麦籽粒脂氧合酶活力的研究[J]. 核农学报, 2016, 0(5): 926-933. DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2016.05.0926
作者姓名:林立昊  惠宏杉  齐军仓  廖乐  程海涛  王超龙  郭亚南
作者单位:石河子大学新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,新疆石河子,832000
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项(CARS-05)“十二五”兵团重点领域科技攻关专项(2011BA002);石河子大学科学技术研究发展计划“动植物育种专项计划”(gxja2011-yz05)
摘    要:为了明确影响啤酒大麦籽粒脂氧合酶(LOX-1)活力的参数,以甘啤4号啤酒大麦籽粒为研究对象,采用紫外分光光度法探究底物浓度、提取缓冲液p H、反应体系缓冲液p H、提取时间、粗酶加入量∶底物加入量等对LOX-1活力的影响。结果表明,LOX-1活力随底物浓度的增加表现为先增加后减小的趋势,当底物浓度达到0.30mmol·L~(-1)时,LOX-1活力显著高于其它处理;随提取缓冲液p H的增加,LOX-1活力表现为双峰变化趋势,且在p H值5.0处,酶活力为9.85U·g~(-1),显著高于其它处理;粗酶提取时间为30min时,LOX-1活力显著高于其它处理,低于或者高于30min,酶活力均呈现降低趋势;LOX-1活力随反应体系p H的增加,表现为双峰变化趋势,当p H值为6.4时,酶活力最大,且与其它处理间存在显著差异;在其它条件不变,粗酶加入量为50μL的情况下,增加底物加入量,LOX-1活力表现为先增加后减小的趋势,且底物加入量为200μL时,酶活力显著高于其它处理。最终确定紫外分光光度法的测定参数:粗酶提取时间为30min,底物浓度为0.25mmol·L~(-1),提取液和反应体系缓冲液分别为p H值5.0醋酸盐缓冲液与p H值6.4磷酸盐缓冲液,粗酶加入酶量∶底物加入量为1∶4。研究结果为紫外分光光度法在啤酒大麦籽粒LOX-1活力测定中的应用提供了参考。

关 键 词:啤酒大麦  脂氧合酶  紫外分光光度法  最适条件

Determination of Lipoxygenase Activity in Barley Grain by UV Spectrophotometry
Abstract:
Keywords:barley  lipoxygenase  UV spectrophotometry  optimum condition
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