多重PCR筛查检测进口转基因玉米 |
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引用本文: | 尹全,李忆,宋君,侯雪,王东,张富丽,刘文娟,常丽娟,雷绍荣.多重PCR筛查检测进口转基因玉米[J].核农学报,2016(6):1045-1053. |
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作者姓名: | 尹全 李忆 宋君 侯雪 王东 张富丽 刘文娟 常丽娟 雷绍荣 |
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作者单位: | 1. 四川省农业科学院分析测试中心,四川 成都,610066;2. 四川民族学院,四川 康定,626001 |
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基金项目: | 四川省财政现代农业技术创新与示范专项资金项目(2014CXSF-040);四川省教育厅自然科学一般项目(15ZB0331);四川省科技厅项目(2014HH0031) |
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摘 要: | 为获得进口转基因玉米筛查检测策略,并根据策略建立多重PCR方法,对15个进口转基因玉米分子特征进行分析。结果表明,将P-Ca MV 35S、T-NOS等2个基因组合作为检测策略可全部检出15个进口转基因玉米至少1次;将P-Ca MV 35S、P-ract1、T-NOS、bar、pat、PMI等6个基因组合作为检测策略,除MON810检出1次外,其他每个转化体可检出至少2次。同时,利用获得的筛查检测策略建立多重PCR体系,对2个基因组合的策略优化,结果表明适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol·L-1)配比为0.2∶0.2;对6个基因组合的策略优化,结果表明适宜退火温度为60℃,引物终浓度配比为0.2∶0.1∶0.1∶0.1∶0.1∶0.05。采用已知样品对多重PCR体系进行验证,图谱显示与转化体分子特征完全一致。该研究结果将为进口转基因玉米筛查检测提供参考。
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关 键 词: | 转基因玉米 多重PCR 筛查 检测 |
Multiplex PCR Detection of Exogenous Gene in the Imported Genetically Modified Maize |
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Abstract: | |
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Keywords: | genetically modified maize multiplex PCR screening detection |
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