鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的可溶性表达及其免疫原性研究

VP2蛋白是鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的主要结构蛋白及保护性抗原，为了研究原核表达的IBDV VP2可溶性蛋白的免疫原性，从IBDV超强毒SD株克隆出VP2基因，将其克隆于pET-30a原核表达质粒，并转化至大肠杆菌菌株BL21中，诱导表达后，经SDS-PAGE及Western blot分析，发现在37 kDa处出现特异性蛋白条带，与预期结果一致，且大部分VP2蛋白存在于菌液上清液中。经诱导条件的优化，菌液上清液表达的VP2蛋白琼脂扩散(AGP)效价可达1∶16。用不同AGP效价的VP2蛋白乳化配苗，免疫SPF鸡，免疫后21 d，进行AGP抗体效价测定及攻毒保护试验，发现VP2蛋白以AGP效价不低于1∶8配苗，免疫鸡用超强毒SD株及经典株BC6/85株攻毒，保护率均为10/10。结果表明，成功获得了表达VP2可溶性蛋白的基因工程表达菌BL21-VP2，且表达的VP2蛋白具有良好的免疫原性，为IBDV基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。