| 柑橘钙离子结合蛋白基因克隆及植物表达载体构建 |
| |
| 引用本文： | 贝学军.柑橘钙离子结合蛋白基因克隆及植物表达载体构建[J].中国果业信息,2012,41(3). |
| |
| 作者姓名： | 贝学军 |
| |
| 作者单位： | 西南大学柑橘研究所 |
| |
| 基金项目： | 重庆市科技攻关计划项目（CSTTC, 2007AA1018）; 现代农业（柑橘）产业技术体系建设专项 |
| |
| 摘 要： | 以伏令夏橙叶片中分离的总RNA为模板，经RT-PCR扩增到一条约600bp的富含柑橘钙离子结合蛋白（CsCaBP）的基因片段，将此片段克隆到pMD-19T中，经测序分析该片段与甜橙基因组中的对应序列完全吻合。设计2对带有限制性内切酶位点的特异性引物，以cDNA为模板扩增到2个CsCaBP片段，经双酶切消化后，分别以正反2个方向插入到植物表达载体pFGC5941的查耳酮合成酶(CHSA)内含子两侧，构建成功CsCaBP基因的RNA干扰载体，但未得获转基因植株。将钙离子结合蛋白基因的正向片段定向克隆到具有CaMV35S启动子的pFGC5941表达质粒上，构建成功CsCaBP过量表达载体。将构建好的表达载体导入根癌农杆菌LBA4404菌株，转化酸橙下胚轴，经PCR检测，获得10株过量表达转基因植株。
|
| 关 键 词： | 柑橘 钙离子结合蛋白基因 基因克隆 遗传转化 |
| 收稿时间： | 2012/3/12 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/4/25 0:00:00 |
Cloning of a calcium binding protein gene from Citrus sinensis and construction of sense and antisense expression vectors |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Citrus calcium binding protein gene cloning Genetic transformation |
|
| 点击此处可从《中国果业信息》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国果业信息》下载免费的PDF全文 |
