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介导分泌表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建
引用本文:张春雷,靳立明,叶 昱,张 杰,朱 俊,高又文,廖 明,樊惠英. 介导分泌表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建[J]. 华南农业大学学报, 2013, 34(4): 564-568
作者姓名:张春雷  靳立明  叶 昱  张 杰  朱 俊  高又文  廖 明  樊惠英
作者单位:华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,;华南农业大学 兽医学院,农业部兽用疫苗创制重点实验室,
基金项目:863计划项目(2011AA10A209);973计划项目(2011CB504701);广州市“珠江科技新星专项”项目(2012J2200086);公益性行业(农业)科研专项(201303034)
摘    要:应用杆状病毒表达系统,将猪圆环病毒2型 ORF2 基因插入供体质粒pFastBacTMDual pH启动子控制下的多克隆位点,引入EGT信号肽取代 ORF2 原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体,提取重组Bacmid质粒.将阳性重组Bacmid质粒转染Sf9昆虫细胞,72 h收集培养上清液获得重组杆状病毒.间接免疫荧光试验和Western-blot表明,该重组杆状病毒可以在昆虫细胞实现猪圆环病毒2型Cap蛋白的分泌表达.

关 键 词:猪圆环病毒2型;ORF2 基因  EGT信号肽   Cap蛋白; 重组杆状病毒
收稿时间:2013-02-07

Construction of a Recombinant Baculovirus Secreted Expression Vector in Cap Protein of Porcine Circovirus Type 2
ZHANG Chunlei,JIN Liming,YE Yu,ZHANG Jie,ZHU Jun,GAO Youwen,LIAO Ming and FAN Huiying. Construction of a Recombinant Baculovirus Secreted Expression Vector in Cap Protein of Porcine Circovirus Type 2[J]. JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY, 2013, 34(4): 564-568
Authors:ZHANG Chunlei  JIN Liming  YE Yu  ZHANG Jie  ZHU Jun  GAO Youwen  LIAO Ming  FAN Huiying
Affiliation:Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,;Key Laboratory of Veterinary Vaccine Development, Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University,
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